著名医師による解説が無料で読めます
すると翻訳の精度が向上します
血小板由来の微小胞の形成のメカニズムは議論の余地があります。現在の研究の目的は、GPIIB-IIIA複合体の関与の可能性を考慮して、微小胞の形成、および血小板表面の凝固剤材料としての負に帯電したリン脂質の暴露を研究することでした。これは、GPIIB-IIIAと健康な献血者を欠いている3人のグランツマンの血栓症患者から血液で研究されました。補体系を活性化し、膜透過化、ADP（9.37 microM）、およびトロンビン受容体ペプチドペプチドSFLLRN（100 microM）を介してGタンパク質を介して血小板を活性化するトロンビン受容体ペプチドSFLLRN（100マイクローム）により、微小胞を生成するCD9に対してmAb FN52を使用しました。一連の実験では、血小板をPGE1（20 microM）でプレインキュベートしました。粒子の総数（血小板を含む）のパーセントとしての解放された微小胞の数は、GPIIIAまたはGPIBに対するFITC共役抗体を含むフローサイトメトリーを使用して測定されました。GPIIB-IIIAの活性化は、PAC-1の結合として検出され、アミノリン脂質がアネキシンVの結合としての曝露として検出されました。正常なドナーとの結合により、補体システムの活性化は、形状変化中に可逆的なPAC-1結合を誘導しました。アネキシンVの大規模な結合は、形状変化中に不可逆的なプロセスとして見られ、PAC-1結合の逆転後に続いた多数の微小胞（60.6 +/- 2.7％）の形成が見られました。PGE1とのプレインキュベーションは、アネキシンVの結合や微小胞の形成（49.5 +/- 2.7％）の形成を妨げませんでしたが、補体活性化後の形状変化とPAC-1結合を廃止しました。血栓症状の血小板は、PAC-1結合の欠如を除き、補体の活性化後に正常な血小板のように振る舞いました（PGE1および微小胞の形成の影響に関する）。100 microM sfllrnによる正常な血小板の刺激により、16.3 +/- 1.2％微小胞、強力なPAC-1およびアネキシンV結合が得られました。PGE1との前インキュベーション後、PAC-1もアネキシンV結合も、かなりの量の微小胞も検出できませんでした。血栓ゼン血小板のsfllrn活性化は、小さいがかなりの数の微小胞を生成しました（6.4 +/- 0.8％）。PGE1とのプレインキュベーション後の血栓ゼン系血小板とSfllrnとのインキュベーションにより、通常の血小板の結果と同一の結果が得られました。正常な血小板のADP活性化により、PAC-1結合が得られましたが、有意なアネキシンV標識も微小胞も生成されませんでした。したがって、微小胞の脱落の異なる誘導者は、さまざまなメカニズムによって作用するようです。すべての誘導者について、凝固剤表面の曝露と微小胞の形成との間に強い相関があり、微小胞の形成のメカニズムがアミノホン脂質の曝露に関連していることを示唆しています。また、結果は、GPIIB-IIIA複合体が補体システムの活性化後の微小胞の形成には必要ではないが、SFLLRNでの刺激後に重要ではないようですが、絶対に必要ではないようです。
血小板由来の微小胞の形成のメカニズムは議論の余地があります。現在の研究の目的は、GPIIB-IIIA複合体の関与の可能性を考慮して、微小胞の形成、および血小板表面の凝固剤材料としての負に帯電したリン脂質の暴露を研究することでした。これは、GPIIB-IIIAと健康な献血者を欠いている3人のグランツマンの血栓症患者から血液で研究されました。補体系を活性化し、膜透過化、ADP（9.37 microM）、およびトロンビン受容体ペプチドペプチドSFLLRN（100 microM）を介してGタンパク質を介して血小板を活性化するトロンビン受容体ペプチドSFLLRN（100マイクローム）により、微小胞を生成するCD9に対してmAb FN52を使用しました。一連の実験では、血小板をPGE1（20 microM）でプレインキュベートしました。粒子の総数（血小板を含む）のパーセントとしての解放された微小胞の数は、GPIIIAまたはGPIBに対するFITC共役抗体を含むフローサイトメトリーを使用して測定されました。GPIIB-IIIAの活性化は、PAC-1の結合として検出され、アミノリン脂質がアネキシンVの結合としての曝露として検出されました。正常なドナーとの結合により、補体システムの活性化は、形状変化中に可逆的なPAC-1結合を誘導しました。アネキシンVの大規模な結合は、形状変化中に不可逆的なプロセスとして見られ、PAC-1結合の逆転後に続いた多数の微小胞（60.6 +/- 2.7％）の形成が見られました。PGE1とのプレインキュベーションは、アネキシンVの結合や微小胞の形成（49.5 +/- 2.7％）の形成を妨げませんでしたが、補体活性化後の形状変化とPAC-1結合を廃止しました。血栓症状の血小板は、PAC-1結合の欠如を除き、補体の活性化後に正常な血小板のように振る舞いました（PGE1および微小胞の形成の影響に関する）。100 microM sfllrnによる正常な血小板の刺激により、16.3 +/- 1.2％微小胞、強力なPAC-1およびアネキシンV結合が得られました。PGE1との前インキュベーション後、PAC-1もアネキシンV結合も、かなりの量の微小胞も検出できませんでした。血栓ゼン血小板のsfllrn活性化は、小さいがかなりの数の微小胞を生成しました（6.4 +/- 0.8％）。PGE1とのプレインキュベーション後の血栓ゼン系血小板とSfllrnとのインキュベーションにより、通常の血小板の結果と同一の結果が得られました。正常な血小板のADP活性化により、PAC-1結合が得られましたが、有意なアネキシンV標識も微小胞も生成されませんでした。したがって、微小胞の脱落の異なる誘導者は、さまざまなメカニズムによって作用するようです。すべての誘導者について、凝固剤表面の曝露と微小胞の形成との間に強い相関があり、微小胞の形成のメカニズムがアミノホン脂質の曝露に関連していることを示唆しています。また、結果は、GPIIB-IIIA複合体が補体システムの活性化後の微小胞の形成には必要ではないが、SFLLRNでの刺激後に重要ではないようですが、絶対に必要ではないようです。
The mechanism of formation of platelet-derived microvesicles remains controversial. The aim of the present work was to study the formation of microvesicles in view of a possible involvement of the GPIIb-IIIa complex, and of exposure of negatively charged phospholipids as procoagulant material on the platelet surface. This was studied in blood from three Glanzmann's thrombasthenia patients lacking GPIIb-IIIa and healthy blood donors. MAb FN52 against CD9 which activates the complement system and produces microvesicles due to a membrane permeabilization, ADP (9.37 microM), and the thrombin receptor agonist peptide SFLLRN (100 microM) that activates platelets via G-proteins were used as inducers. In a series of experiments platelets were also preincubated with PGE1 (20 microM). The number of liberated microvesicles, as per cent of the total number of particles (including platelets), was measured using flow cytometry with FITC conjugated antibodies against GPIIIa or GPIb. Activation of GPIIb-IIIa was detected as binding of PAC-1, and exposure of aminophospholipids as binding of annexin V. With normal donors, activation of the complement system induced a reversible PAC-1 binding during shape change. A massive binding of annexin V was seen during shape change as an irreversible process, as well as formation of large numbers of microvesicles (60.6 +/- 2.7%) which continued after reversal of the PAC-1 binding. Preincubation with PGE1 did not prevent binding of annexin V, nor formation of microvesicles (49.5 +/- 2.7%), but abolished shape change and PAC-1 binding after complement activation. Thrombasthenic platelets behaved like normal platelets after activation of complement except for lack of PAC-1 binding (also with regard to the effect of PGE1 and microvesicle formation). Stimulation of normal platelets with 100 microM SFLLRN gave 16.3 +/- 1.2% microvesicles, and strong PAC-1 and annexin V binding. After preincubation with PGE1 neither PAC-1 nor annexin V binding, nor any significant amount of microvesicles could be detected. SFLLRN activation of the thrombasthenic platelets produced a small but significant number of microvesicles (6.4 +/- 0.8%). Incubation of thrombasthenic platelets with SFLLRN after preincubation with PGE1, gave results identical to those of normal platelets. ADP activation of normal platelets gave PAC-1 binding, but no significant annexin V labelling, nor production of microvesicles. Thus, different inducers of the shedding of microvesicles seem to act by different mechanisms. For all inducers there was a strong correlation between the exposure of procoagulant surface and formation of microvesicles, suggesting that the mechanism of microvesicle formation is linked to the exposure of aminophospholipids. The results also show that the GPIIb-IIIa complex is not required for formation of microvesicles after activation of the complement system, but seems to be of importance, but not absolutely required, after stimulation with SFLLRN.
医師のための臨床サポートサービス
ヒポクラ x マイナビのご紹介
無料会員登録していただくと、さらに便利で効率的な検索が可能になります。