主にベータシートタンパク質であるベータラクトグロブリンの繰り返しにおける非ネイティブアルファヘリカル中間体

一般に、折り畳み中間体には部分的に形成されたネイティブのような二次構造が含まれていると想定されています。ただし、中間状態の立体構造の安定性がネイティブ状態のそれよりも単純であるという事実を考えると、折り畳み中間体の二次構造は必ずしもネイティブ状態の構造と類似しているわけではないと予想されます。ベータラクトグロブリンは、主にベータシートタンパク質ですが、アルファヘリカル構造に対して著しく高い固有の好みを持っています。私たちは、停止した流れの円形二球菌を使用して、ウシベータラクトグロブリンのろ過速度論を研究し、部分的にアルファヘリカルの中間体がネイティブベータシートの形成前に一時的に蓄積することを発見しました。現在の結果は、ベータラクトグロブリンの折り畳み反応が非階層メカニズムに従うことを示唆しています。

It is generally assumed that folding intermediates contain partially formed native-like secondary structures. However, if we consider the fact that the conformational stability of the intermediate state is simpler than that of the native state, it would be expected that the secondary structures in a folding intermediate would not necessarily be similar to those of the native state. beta-Lactoglobulin is a predominantly beta-sheet protein, although it has a markedly high intrinsic preference for alpha-helical structure. We have studied the refolding kinetics of bovine beta-lactoglobulin using stopped-flow circular dichroism and find that a partly alpha-helical intermediate accumulates transiently before formation of the native beta-sheets. The present results suggest that the folding reaction of beta-lactoglobulin follows a non-hierarchical mechanism, in which non-native alpha-helical structures play important roles.