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ドキシサイクリン（DOX）が特異的に操作されたRNAポリメラーゼIIプロモーターの誘導剤として作用するTET調節システムをトランスジェニックマウスに移しました。動物の給水におけるDOX濃度に応じて、最大5桁にわたる幅広い規制と幅広い規制が監視されました。DOXの投与は、一部の臓器で最初の4時間以内に数桁以上にわたって活性が上昇するインジケーター酵素ルシフェラーゼの合成を急速に誘導します。誘導は、分析されたほとんどの臓器で24時間後に完了します。DOXが転写の活性化を防ぐTET調節システムでは、同等の調節可能性が明らかになりました。テトラサイクリン制御トランステイベーター（TTA）の合成を肝臓に指示することにより、肝細胞の非常に特異的な調節が発生し、DOXの存在下では、細胞ごとに1分子のルシフェラーゼが検出されました。対照的に、ルシフェラーゼ遺伝子の10（5）以上の活性化が抗生物質の非存在下で観察されました。この規制は全体を通して均質でしたが、肝細胞に厳密に制限されていました。これらの結果は、両方のテトラサイクリン制御転写活性化システムが、トランスジェニックマウスの遺伝子活性の定量的制御を組織固有の方法で可能にし、したがって、新しいタイプの条件付き変異体の生成の可能性を示唆する遺伝的スイッチを提供することを示しています。
ドキシサイクリン（DOX）が特異的に操作されたRNAポリメラーゼIIプロモーターの誘導剤として作用するTET調節システムをトランスジェニックマウスに移しました。動物の給水におけるDOX濃度に応じて、最大5桁にわたる幅広い規制と幅広い規制が監視されました。DOXの投与は、一部の臓器で最初の4時間以内に数桁以上にわたって活性が上昇するインジケーター酵素ルシフェラーゼの合成を急速に誘導します。誘導は、分析されたほとんどの臓器で24時間後に完了します。DOXが転写の活性化を防ぐTET調節システムでは、同等の調節可能性が明らかになりました。テトラサイクリン制御トランステイベーター（TTA）の合成を肝臓に指示することにより、肝細胞の非常に特異的な調節が発生し、DOXの存在下では、細胞ごとに1分子のルシフェラーゼが検出されました。対照的に、ルシフェラーゼ遺伝子の10（5）以上の活性化が抗生物質の非存在下で観察されました。この規制は全体を通して均質でしたが、肝細胞に厳密に制限されていました。これらの結果は、両方のテトラサイクリン制御転写活性化システムが、トランスジェニックマウスの遺伝子活性の定量的制御を組織固有の方法で可能にし、したがって、新しいタイプの条件付き変異体の生成の可能性を示唆する遺伝的スイッチを提供することを示しています。
The tet regulatory system in which doxycycline (dox) acts as an inducer of specifically engineered RNA polymerase II promoters was transferred into transgenic mice. Tight control and a broad range of regulation spanning up to five orders of magnitude were monitored dependent on the dox concentration in the water supply of the animals. Administration of dox rapidly induces the synthesis of the indicator enzyme luciferase whose activity rises over several orders of magnitude within the first 4 h in some organs. Induction is complete after 24 h in most organs analyzed. A comparable regulatory potential was revealed with the tet regulatory system where dox prevents transcription activation. Directing the synthesis of the tetracycline-controlled transactivator (tTA) to the liver led to highly specific regulation in hepatocytes where, in presence of dox, less than one molecule of luciferase was detected per cell. By contrast, a more than 10(5)-fold activation of the luciferase gene was observed in the absence of the antibiotic. This regulation was homogeneous throughout but stringently restricted to hepatocytes. These results demonstrate that both tetracycline-controlled transcriptional activation systems provide genetic switches that permit the quantitative control of gene activities in transgenic mice in a tissue-specific manner and, thus, suggest possibilities for the generation of a novel type of conditional mutants.
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