ヒトミトコンドリアDNAポリメラーゼ、DNAポリメラーゼガンマのクローニングと特性評価

核エンコードDNAポリメラーゼガンマ（DNA Polガンマ）は、ミトコンドリアDNAの複製に必要な唯一のDNAポリメラーゼです。ヒトDNA PolガンマのcDNAをクローニングし、遺伝子を染色体位置15q24にマッピングしました。さらに、ショウジョウバエのメラノガスターのDNAポルガンマ遺伝子と、ガルスガルスのDNAポルガンマの部分的なcDNAがクローン化されています。予測されるヒトDNAポルガンマポリペプチドは1239アミノ酸で、計算された分子量は139.5 kDaです。ヒトアミノ酸配列は、それぞれ41.6、43.0、48.7、および77.6％が、それぞれSchizosaccharomyces Pombe、Saccharomyces cerevisiae、ショウジョウバエメラノガスター、およびG. gallのC末端半分と同じです。タンパク質のポリメラーゼ部分に対して隆起したポリクローナル抗体は、ミトコンドリア抽出物中の140 kDaタンパク質と特異的に反応し、ミトコンドリア抽出物からの活性のようなDNA Polガンマのタンパク質を免疫沈降させました。ヒトDNA Polガンマは、遺伝子の最初のエクソンにCag10トリヌクレオチドの繰り返しが含まれているという点でユニークです。

The nuclear-encoded DNA polymerase gamma (DNA POL gamma) is the sole DNA polymerase required for the replication of the mitochondrial DNA. We have cloned the cDNA for human DNA POL gamma and have mapped the gene to the chromosomal location 15q24. Additionally, the DNA POL gamma gene from Drosophila melanogaster and a partial cDNA for DNA POL gamma from Gallus gallus have been cloned. The predicted human DNA POL gamma polypeptide is 1239 amino acids, with a calculated molecular mass of 139.5 kDa. The human amino acid sequence is 41.6, 43.0, 48.7, and 77.6% identical to those of Schizosaccharomyces pombe, Saccharomyces cerevisiae, Drosophila melanogaster, and the C-terminal half of G. gallus, respectively. Polyclonal antibodies raised against the polymerase portion of the protein reacted specifically with a 140-kDa protein in mitochondrial extracts and immunoprecipitated a protein with DNA POL gamma like activity from mitochondrial extracts. The human DNA POL gamma is unique in that the first exon of the gene contains a CAG10 trinucleotide repeat.