多核核白血球接着は、内皮細胞間接着接合部の混乱を引き起こします

多核白血球（PMN）組織への浸潤は、血管透過性の増加を頻繁に伴うことがよくあります。これは、PMNの接着と移動が内皮細胞間接合部のアーキテクチャの変更を引き起こす可能性があることを示唆しています。本論文では、間接免疫蛍光を使用して、腫瘍壊死因子活性化内皮細胞（EC）へのPMN接着が、接着接合部（AJ）成分の内皮細胞間接触からの消失を誘発することがわかりました。カドヘリン、アルファカテニン、ベータカテニン、およびプラコグロビン。VE-カドヘリン/カテニン複合体の免疫沈降とウエスタンブロット分析により、ベータカテニンとプラコグロビンの量が複合体と総細胞抽出物から著しく減少したことが示されました。対照的に、VE-カドヘリンとアルファカテニンは部分的にしか影響を受けませんでした。PMNによる内皮AJの混乱はECの収縮または損傷を伴わず、細胞接触での血小板/内皮細胞接着分子1（PECAM-1）分布が変化していないため、VE-カドヘリン/カテニン複合体に特異的でした。ECへのPMNの接着は、VE-カドヘリン/カテニン複合体の混乱の前提条件のようです。この現象は、PMN接着剤を抗インテグリンベータ2 mAbでブロックすることで完全に阻害できますが、PMAの添加や抗ベータ2活性マブなど、PMN接着の増加を誘発する条件によって再現できます。接着性活性化リンパ球が同様の変化を誘発しなかったため、内皮AJへの影響はPMNに特異的でした。高濃度のプロテアーゼ阻害剤と酸素代謝産物のスカベンジャーは、PMNによって媒介されるAJの混乱を防ぐことができませんでした。ECへのPMNの接着は、in vitroでのEC透過性の増加を伴いました。この効果はPMNの接着に依存しており、プロテアーゼや酸素反応性代謝物によって媒介されず、EGTAでのEC処理によって再現される可能性があります。最後に、免疫組織化学分析により、VE-カドヘリン分布は、in vivoでの血管壁へのPMN接着によって影響を受けることが示されました。この研究は、PMNの接着がVE-カドヘリン /カテニン複合体の混乱を調節する可能性のあるECの細胞内シグナルを引き起こす可能性があることを示唆しています。この効果は、EC透過性を高め、急性炎症反応中のPMN移動を促進する可能性があります。

Polymorphonuclear leukocytes (PMN) infiltration into tissues is frequently accompanied by increase in vascular permeability. This suggests that PMN adhesion and transmigration could trigger modifications in the architecture of endothelial cell-to-cell junctions. In the present paper, using indirect immunofluorescence, we found that PMN adhesion to tumor necrosis factor-activated endothelial cells (EC) induced the disappearance from endothelial cell-to-cell contacts of adherens junction (AJ) components: vascular endothelial (VE)-cadherin, alpha-catenin, beta-catenin, and plakoglobin. Immunoprecipitation and Western blot analysis of the VE-cadherin/catenin complex showed that the amount of beta-catenin and plakoglobin was markedly reduced from the complex and from total cell extracts. In contrast, VE-cadherin and alpha-catenin were only partially affected. Disorganization of endothelial AJ by PMN was not accompanied by EC retraction or injury and was specific for VE-cadherin/catenin complex, since platelet/endothelial cell adhesion molecule 1 (PECAM-1) distribution at cellular contacts was unchanged. PMN adhesion to EC seems to be a prerequisite for VE-cadherin/catenin complex disorganization. This phenomenon could be fully inhibited by blocking PMN adhesion with an anti-integrin beta 2 mAb, while it could be reproduced by any condition that induced increase of PMN adhesion, such as addition of PMA or an anti-beta 2-activating mAb. The effect on endothelial AJ was specific for PMN since adherent activated lymphocytes did not induce similar changes. High concentrations of protease inhibitors and oxygen metabolite scavengers were unable to prevent AJ disorganization mediated by PMN. PMN adhesion to EC was accompanied by increase in EC permeability in vitro. This effect was dependent on PMN adhesion, was not mediated by proteases and oxygen-reactive metabolites, and could be reproduced by EC treatment with EGTA. Finally, immunohistochemical analysis showed that VE-cadherin distribution was affected by PMN adhesion to the vessel wall in vivo too. This work suggests that PMN adhesion could trigger intracellular signals in EC that possibly regulate VE-cadherin /catenin complex disorganization. This effect could increase EC permeability and facilitate PMN transmigration during the acute inflammatory reaction.