ステフィンA、B、Dとシステインプロテイナーゼとの相互作用の特異性の違い

4つの異なるステフィン型システインプロテイナーゼ阻害剤がブタ胸腺と皮膚から分離されています。アミノ酸配列の測定により、ステフィンAおよびステフィンB型阻害剤と、ブタステフィンD1およびステフィンD2として指定された2つの新しい阻害剤の存在が明らかになりました。ステフィンD1は、最近ブタの多核核白血球から特徴付けられた阻害剤であるPLCPIとして同定されました[Lenarcic et al。（1993）Febs Lett。336、289-292]。Stefin Aは101アミノ酸で構成されており、MR 391のMRを持ち、ステフィンBには98のアミノ酸が含まれており、MR 174があり、N末端にブロックされています。すべての阻害剤は、パパイン、カテプシンLおよびカテプシンS（Ki = 0.009-0.161 nm）の迅速な阻害剤であることがわかった。Stefins AとBは、Cathepsin H（それぞれKi = 0.027および0.069 nm）にしっかりと迅速に結合し、Stefins D1とD2はカテプシンHの非常に不十分な阻害剤であることが示されています（Ki = 102-150 nm）。カテプシンB（Ki = 2-1700 nm）に対するこれらの阻害剤の親和性の低下は、主に2次関連率定数が低いためであることが示されました。Stefin D1に非常に負に帯電したN末端の存在は、阻害剤の特異性の可能性のある構造決定因子を構成します。

Four different stefin-type cysteine proteinase inhibitors have been isolated from porcine thymus and skin. Amino acid sequence determination revealed the presence of stefin A and stefin B type inhibitors and two new inhibitors, designated as porcine stefin D1 and stefin D2. Stefin D1 was identified as PLCPI, an inhibitor recently characterized from porcine polymorphonuclear leukocytes [Lenarcic et al. (1993) FEBS Lett. 336, 289-292]. Stefin A is composed of 101 amino acids and has an Mr of 11 391 while stefin B contains 98 amino acids, has an Mr of 11 174 and is N-terminally blocked. All inhibitors were found to be fast-acting inhibitors of papain, cathepsin L and cathepsin S (Ki = 0.009-0.161 nM). Stefins A and B also bind tightly and rapidly to cathepsin H (Ki = 0.027 and 0.069 nM, respectively), while stefins D1 and D2 have been shown to be very poor inhibitors of cathepsin H (Ki = 102-150 nM). The decreased affinity of these inhibitors toward cathepsin B (Ki = 2-1700 nM) was shown to be mainly due to the low second order association rate constants. The presence of a highly negatively charged N-terminus on stefin D1 constitutes a likely structural determinant of inhibitor specificity.