過分極活性化陽イオン電流のバ​​クロフェン阻害、IH、ネグラゾナコンパクトニューロンは、カリウム電流活性化に続発する可能性があります

1.過分極活性化カチオン電流（IH）の特性、およびガンマアミノ酪酸B（GABAB）受容体活性化およびプロテインキナーゼAによるその変調は、実質的なニグラゾナコンパクトなプリンシパルニューロンの全細胞電圧クランプを使用して調査されました。in vitroでラット中脳のスライス。2。30度Cで、IHは-75から-155 mVの間で活性化され、V1/2は-115 mVです。35度Cでは、活性化曲線が10 mVにシフトしました。IHには、-27 mVの推定反転電位がありました。イオン置換実験により、電流がNa+とK+によって運ばれることが示されました。3。ガバブ受容体アゴニストバクロフェン（30ミクロム）の適用により、外向きのカリウム電流（girk）が誘導され、神経膜コンダクタンスが増加し、IHが阻害されました。IHの阻害は、独立した電圧でした。バクロフェンは、IHの反転ポテンシャルに11 mVの正のシフトを誘導しました。4.細胞外バリウム（300 microM）は、girkの活性化による膜コンダクタンスのバクロフェン誘発電流と関連する増加を著しく減少させました。また、バリウムの存在下でバクロフェンによるIHの阻害はほとんどありませんでした。セシウムが主要な細胞内陽イオンであった場合、ガークの活性化による膜コンダクタンスの増加とバクロフェンによって誘発されたIHの阻害の両方が同様の程度減少しました。5.フォルスコリン（10ミクロム）もプロテインキナーゼA阻害剤H89（10 microM）も、バクロフェンによるIHまたはその阻害に影響を与えませんでした。6.これらのデータは、バクロフェンによるIHの阻害は、girkの活性化に続発すること、つまり、明確な効果ではなく膜コンダクタンスの変化によるものであり、アディリルシクラーゼの阻害によって媒介されないことを示唆しています。

1. The properties of the hyperpolarization-activated cation current (Ih), and its modulation by gamma-aminobuturic acid-B (GABAB) receptor activation and protein kinase A, were investigated using whole cell voltage clamp of substantia nigra zona compacta principal neurons in rat midbrain slices in vitro. 2. At 30 degrees C, Ih activated between -75 and -155 mV, with a V1/2 of -115 mV. At 35 degrees C, the activation curve shifted positive by 10 mV. Ih had an estimated reversal potential of -27 mV. Ion substitution experiments showed that the current was carried by Na+ and K+. 3. Application of the GABAB receptor agonist baclofen (30 microM) induced an outward potassium current (GIRK), increased neuronal membrane conductance and inhibited Ih. The inhibition of Ih was voltage independent. Baclofen induced an 11-mV positive shift in the reversal potential of Ih. 4. Extracellular barium (300 microM) markedly reduced the baclofen-evoked outward current and associated increase in membrane conductance due to GIRK activation. There was also very little inhibition of Ih by baclofen in the presence of barium. When cesium was the major intracellular cation, both the increase in membrane conductance due to GIRK activation and the inhibition of Ih evoked by baclofen were reduced by a similar extent. 5. Neither forskolin (10 microM) nor the protein kinase A inhibitor, H89 (10 microM), had any effect on Ih or its inhibition by baclofen. 6. These data suggest that the inhibition of Ih by baclofen is secondary to the activation of GIRK, i.e., due directly to alteration of membrane conductance, rather than a distinct effect, and is not mediated by inhibition of adenylyl cyclase.