チオールのヒドロキシルラジカルおよびペルオキシ亜鉛媒介媒介酸化中に形成されたチルラジカル付加物の検出 - Qバンド（35 GHz）での高解像度ESRスピントラップ研究

チオールのペルオキシン酸化またはヒドロキシルラジカル依存性酸化、すなわちグルタチオン（GSH）およびL-システイン（CYSH）の間に形成されたチルラジカル（Rs。）には、5,5'-ジメチル-1-ピロロリンN-オキシド（DMPOE）に閉じ込められました。）およびXバンドおよびQバンド電子スピン共鳴（ESR）分光法により分析されます。Xバンドでは、DMPO-グルタチオニルラジカル付加物（DMPO/.SG）およびDMPO-ヒドロキシルラジカル付加物（DMPO/.OH）のESRパラメーターは水溶液でほぼ類似しており、低地スペクトルラインを除き、結果として、結果として、dmpo/ .sgの残りのスペクトル線は、dmpo/ .oh付加物のものと実質的に過剰なラップです。対照的に、Qバンドでは、DMPO/ .SGによるスペクトル線のほとんどがDMPO/ .OHから分離されていました。スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）を模倣することは、GSHおよびDMPOのONOO（ - ）媒介酸化中のDMPO/.SG付加物ではなく、DMPO/.OH付加物の形成を完全に廃止しました。形成型の存在下で、DMPO/.SGスペクトルは、QバンドESR分光法によって監視されたDMPO/.CO2-スペクトルに置き換えられました。したがって、Qバンドでのスピントラッピングは、ペルオキシシニトライトによる形成のグルタチオニルラジカル依存性酸化の明確な証拠を提供します。DMPO/.SCYSの高解像度QバンドESRスペクトルも取得されました。細胞系のチルラジカルを検出するためのQバンドスピントラップ技術の生物学的応用について説明します。

Thiyl radicals (RS.) formed during peroxynitrite- or hydroxyl radical-dependent oxidation of thiols, i.e., glutathione (GSH) and L-cysteine (CySH) were trapped with 5,5'-dimethyl-1-pyrroline N-oxide (DMPO) and analyzed by X-band and Q-band electron spin resonance (ESR) spectroscopy. At X-band, the ESR parameters of DMPO-glutathionyl radical adduct (DMPO/.SG) and DMPO-hydroxyl radical adduct (DMPO/.OH) are nearly similar in aqueous solutions and as a result, except for the lowfield spectral line, the remaining spectral lines of DMPO/ .SG virtually over-lap with those of the DMPO/.OH adduct. In contrast, at Q-band, most of the spectral lines due to the DMPO/.SG were separated from the DMPO/ .OH. Inclusion of a superoxide dismutase (SOD) mimic completely abolished the formation of the DMPO/.OH adduct and not the DMPO/.SG adduct during ONOO(-)-mediated oxidation of GSH and DMPO. In the presence of formate, the DMPO/.SG spectrum was replaced by the DMPO/.CO2- spectrum which was monitored by Q-band ESR spectroscopy. Thus, spin-trapping at Q-band provides unambiguous proof for the glutathionyl radical-dependent oxidation of formate by peroxynitrite. High resolution Q-band ESR spectra of DMPO/.Scys were also obtained. Biological applications of the Q-band spin-trapping technique to detect thiyl radicals in cellular systems are discussed.