成人ヒト肝T細胞によるRag1、Rag2およびpre-t細胞受容体アルファ鎖発現：鼓膜外T細胞成熟の証拠

移植時に正常な成体肝臓組織から得られた細胞懸濁液のフローサイトメトリー分析により、Tリンパ球のかなりの集団が明らかになりました。これらは、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応を使用した局所T細胞成熟の分子証拠について調べられました。再結合活性化遺伝子1（RAG1）、RAG2およびプレT細胞受容体α鎖（PTALPHA）の発現を検出しました。。肝臓全体の4つの標本はRag1およびRag2発現に対して陽性でしたが、同じ個体の末梢血単核細胞は陰性でした。RAG発現を局在化するために、未熟（CD2+CD7+）および成熟（CD45R0+）T細胞の亜集団は、肝臓および末梢血単核細胞の調製から磁気分離によって分離されました。CD45ro+肝リンパ球では、肝臓CD2+ CD7+の5つの標本でRag1、Rag2、およびpre-Tcralphaの発現を検出しました。末梢血からのCD2+ CD7+細胞の6つの標本のうち4つはRAG1およびRAG2で陰性であったが、6つの標本はすべてPtalpha発現に対して陽性でした。これらの結果は、Pre-T細胞が骨髄または胸腺から他の組織に人身売買されており、適切な細胞および分子環境のコンテキストで分化と選択を継続することを示唆しています。成体肝臓におけるT細胞の未熟な集団の存在と高レベルのRAG発現は、成体肝臓がThrathymic T細胞の成熟のためにそのような環境を提供することを示唆しています。これらの発見は、肝臓移植後の耐性誘導に重要な意味を持ち、自己免疫肝疾患の病因を理解するのに役立ちます。

Flow cytometric analysis of cell suspensions obtained from normal adult liver tissue at the time of transplantation revealed significant populations of T lymphocytes. These were examined for molecular evidence of local T cell maturation using reverse transcription-polymerase chain reaction to detect expression of recombination activation gene 1 (RAG1), RAG2 and pre-T cell receptor alpha chain (pTalpha), which occurs only in early thymocyte development. Four specimens of whole liver were positive for RAG1 and RAG2 expression, whereas peripheral blood mononuclear cells from the same individuals were negative. To localize RAG expression, immature (CD2+CD7+) and mature (CD45R0+) T cell subpopulations were isolated by magnetic separation from hepatic and peripheral blood mononuclear cell preparations. We detected the expression of RAG1, RAG2 and pre-TCRalpha in five specimens of hepatic CD2+CD7+ but not in CD45RO+ hepatic lymphocytes. Four out of six specimens of CD2+CD7+ cells from the peripheral blood were negative for RAG1 and RAG2 while all six specimens were positive for pTalpha expression. These results suggest that pre-T cells are trafficking from the bone marrow or the thymus to other tissues to continue differentiation and selection in the context of an appropriate cellular and molecular environment. The presence of immature populations of T cells in the adult liver and high levels of RAG expression suggests that the adult liver provides such an environment for extrathymic T cell maturation. These findings may have important implications for tolerance induction after liver transplantation and offer help in understanding the etiology of autoimmune liver disease.