ヒト眼組織におけるカリクレイン - キニン系の発現と細胞局在

組織カリクレインは、キニノゲンを処理して生物活性キニンを放出するセリンプロテイナーゼです。キニンは、キニン受容体との相互作用を通じて、さまざまな生物学的プロセスを媒介します。キニンは、血圧と局所血流の調節、血管拡張、平滑筋収縮と弛緩、痛みと炎症の生成、細胞増殖の刺激に関与しています。組織カリクレイン - キニン系は、高血圧、アレルギー、糖尿病などの多くの病態生理学的プロセスに関係しています。本研究では、逆転写 - ポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）およびサザンブロット分析、およびin situハイブリダイゼーション加工組織化学により、人間の眼のカリクレイン - カニン系の成分の発現と局在を特定しました。RT-PCRおよびサザンブロット分析により、組織カリクレイン、低分子量キニノゲン、およびヒト網膜、脈絡膜および繊毛体の高レベルでのブラジキニンB1およびB2受容体など、システムの主要成分のmRNAが検出されました。視神経。in situハイブリダイゼーションにより、眼組織におけるこれら4つのmRNAの細胞局在が特定されました。それらは、外側の核層、内部核層、神経節細胞層を含む網膜神経細胞で発現しています。これらのmRNAは、眼血管、毛様体筋、およびレンズ上皮細胞の内皮細胞でも同定されました。感覚リボプローブは負の染色を示しました。これは、アンチセンスリボプローブの特異性を示しています。これらの結果は、組織カリクレイン - キニン系がヒト眼組織で内因的に生成されていることを示唆しています。カリクレイン、キニノーゲン、キニン受容体の同様の発現パターンは、カリクレイン - カニン系が目の中でオートクリンまたはパラクリンの方法で機能する可能性があることを示しています。

Tissue kallikrein is a serine proteinase which processes kininogens to release bioactive kinins. Kinins mediate a variety of biological processes through the interaction with kinin receptors. Kinins are involved in the regulation of blood pressure and local blood flow, vasodilation, smooth muscle contraction and relaxation, production of pain and inflammation, and stimulation of cell proliferation. The tissue kallikrein-kinin system has been implicated in a number of pathophysiological processes such as hypertension, allergy and diabetes mellitus. In the present study, we have identified the expression and localization of components of the kallikrein-kinin system in the human eye by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and Southern blot analyses, and in situ hybridization histochemistry. RT-PCR and Southern blot analyses have detected mRNAs of the key components of the system including tissue kallikrein, low molecular weight kininogen, and bradykinin B1 and B2 receptors at high levels in human retina, choroid and ciliary body, and relatively low levels in the optic nerve. In situ hybridization has identified cellular localization of these four mRNAs in ocular tissues. They are expressed in retinal neuronal cells including the outer nuclear layer, inner nuclear layer and ganglion cell layer. These mRNAs were also identified in endothelial cells of ocular blood vessels, ciliary muscle and lens epithelial cells. The sense riboprobes showed negative staining, which indicates the specificity of the antisense riboprobes. These results suggest that the tissue kallikrein-kinin system is produced endogenously in human ocular tissues. Similar expression patterns of kallikrein, kininogen and kinin receptors indicate that the kallikrein-kinin system may function in an autocrine or paracrine fashion in the eye.