2-メルカプトエタノールは、核因子カッパB（NFカッパB）の能力を回復し、NF Kappa B By阻害のメカニズムにおけるグルタチオンの酸化に関するピロリジンジチオカルバメート（PDTC）の証拠とインキュベートしたインターロイキン1処理細胞から核抽出物中のDNAを結合する能力を回復します。PDTC

核因子カッパB（NFカッパB）の活性化において、反応性酸素中間体を含む研究では、金属キレートルと抗酸化ピロリジンジチオカルバメート（PDTC）が広く使用されています。他の研究と一致して、PDTCは炎症誘発性サイトカインインターロイキン1（IL1）および腫瘍壊死因子（TNF）に応答してNFカッパB活性化を阻害することを示しました。しかし、還元剤2-メルカプトエタノールで阻害された核抽出物の処理により、阻害が逆転することがわかりました。これは、IL1処理EL4.NOB-1胸腺細胞およびTNF処理Jurkat E6.1リンパ腫細胞から調製された抽出物で観察されました。これらの結果は、この阻害は、おそらくP50サブユニット（両方の細胞型のNFカッパB複合体で検出された）で、敏感なチオールでのNFカッパBの酸化によって引き起こされ、活性化経路の阻害によってではないことを示唆しました。したがって、PDTCが酸化促進剤として機能していた可能性が調査されました。PDTCは酸化されたグルタチオンの増加を引き起こし、抗酸化剤としてではなく、テストされた細胞で酸化剤として作用することを示唆しています。同様の結果は、グルタチオンを酸化するように設計された化合物であるジアミドで得られました。最後に、グルタチオンの減少に対する酸化の比率の増加は、in vitroでNFカッパB-DNA結合を阻害することが示されました。これらの結果に基づいて、NFカッパBの活性化はPDTCの影響を受けませんが、DNA結合は酸化条件へのシフトを含むメカニズムによって阻害され、これが細胞内のPDTCとジアミドの両方の作用メカニズムであることを示唆しています。ここでテストしました。

The metal chelator and anti-oxidant pyrollidine dithiocarbamate (PDTC) has been used extensively in studies implicating reactive oxygen intermediates in the activation of nuclear factor kappa B (NF kappa B). In agreement with other studies, we have shown that PDTC inhibits NF kappa B activation in response to the pro-inflammatory cytokines interleukin 1 (IL1) and tumour necrosis factor (TNF). However, we have found that the inhibition was reversed by treatment of inhibited nuclear extracts with the reducing agent 2-mercaptoethanol. This was observed in extracts prepared from IL1-treated EL4.NOB-1 thymoma cells and TNF-treated Jurkat E6.1 lymphoma cells. These results suggested that the inhibition was caused by oxidation of NF kappa B on a sensitive thiol, possibly on the p50 subunit (which was detected in NF kappa B complexes in both cell types), and not by inhibition of the activation pathway. The possibility that PDTC was acting as a pro-oxidant was therefore investigated. PDTC caused an increase in oxidized glutathione, suggesting that it acts as an oxidizing agent in the cells tested rather than as an anti-oxidant. Similar results were obtained with diamide, a compound designed to oxidize glutathione. Finally, an increase in the ratio of oxidized to reduced glutathione was shown to inhibit NF kappa B-DNA binding in vitro. On the basis of these results we suggest that, while NF kappa B activation is unaffected by PDTC, DNA binding is inhibited through a mechanism involving a shift towards oxidizing conditions, and that this is the mechanism of action of both PDTC and diamide in the cells tested here.