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Journal of cell science1996Dec01Vol.109 ( Pt 13)issue()

動物細胞の中心体のほとんどは中心体関連ではなく、中心体中心線は中心小体の遠位内腔に限定されています

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

Centrinは、広く発散する種の中心体に存在するカルシウム結合EFハンドタンパク質スーパーファミリーのメンバーです。免疫蛍光と細胞分画の両方によるヒトセントリンの細胞分布を調査すると、Centrinはヒト細胞で生化学的に複雑であり、2D電気泳動で最大10個のアイソフォームを示すことを報告します。これは、Centrinが複数の規制の影響を受ける可能性があることを示唆しています。驚くべきことに、セントリンの90%以上はセントロソーム画分と関連していません。しかし、中心体関連のセントリンは、2-D電気泳動に特定のパターンを示し、複雑な構造が以前に記述された中心小体の遠位腔内に濃縮されます。この正確な局在化により、細胞周期全体で光学レベルで中心小体の解像度が可能になり、中心葉重複を監視するための貴重なツールが提供されます。セントリン機能に関する洞察を得るために、2細胞段階のカエル胚における組換えヘテロログセントリンの注射実験を行い、支配的な負の効果を生み出しました。緑の藻類とヒトのセントリンは切断を遅らせ、微小管がアスターおよび核の分布が劇的に損なわれる異常な胚盤胞の形成を促進することを報告します。これは、CentrinがCentrosome繁殖サイクル、細胞質および核分割の調整、または細胞質分裂に関与している可能性があることを示唆しています。

Centrinは、広く発散する種の中心体に存在するカルシウム結合EFハンドタンパク質スーパーファミリーのメンバーです。免疫蛍光と細胞分画の両方によるヒトセントリンの細胞分布を調査すると、Centrinはヒト細胞で生化学的に複雑であり、2D電気泳動で最大10個のアイソフォームを示すことを報告します。これは、Centrinが複数の規制の影響を受ける可能性があることを示唆しています。驚くべきことに、セントリンの90%以上はセントロソーム画分と関連していません。しかし、中心体関連のセントリンは、2-D電気泳動に特定のパターンを示し、複雑な構造が以前に記述された中心小体の遠位腔内に濃縮されます。この正確な局在化により、細胞周期全体で光学レベルで中心小体の解像度が可能になり、中心葉重複を監視するための貴重なツールが提供されます。セントリン機能に関する洞察を得るために、2細胞段階のカエル胚における組換えヘテロログセントリンの注射実験を行い、支配的な負の効果を生み出しました。緑の藻類とヒトのセントリンは切断を遅らせ、微小管がアスターおよび核の分布が劇的に損なわれる異常な胚盤胞の形成を促進することを報告します。これは、CentrinがCentrosome繁殖サイクル、細胞質および核分割の調整、または細胞質分裂に関与している可能性があることを示唆しています。

Centrin is a member of the calcium-binding EF-hand protein superfamily present in centrosomes of widely divergent species. Investigating the cellular distribution of human centrin by both immunofluorescence and cell fractionation, we report that centrin is biochemically complex in human cells, displaying as much as ten isoforms in 2-D electrophoresis. This suggests that centrin may be subject to multiple regulations. Strikingly, more than 90% of centrin is not associated with the centrosome fraction. The centrosome-associated centrin, however, displays a specific pattern in 2-D electrophoresis and is concentrated within the distal lumen of the centrioles, where a complex structure has been previously described. This precise localization allows the resolution of centrioles at the optical level throughout the cell cycle and provides a valuable tool for monitoring centriole duplication. To get insights on centrin function, we performed injection experiments of recombinant heterologous centrin in two-cell stage frog embryos in an attempt to produce dominant negative effects. We report that green algae and human centrin delay cleavage and promote the formation of abnormal blastomeres in which the distribution of microtubule asters and of nuclei is dramatically impaired. This suggests that centrin could be involved in the centrosome reproduction cycle, in the coordination of cytoplasmic and nuclear division or in cytokinesis.

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