ZP3-CRE、雌の生殖系統に特にLOXPフランクされた標的遺伝子の活性化または不活性化のためのトランスジェニックマウス系統

部位特異的DNAリコンビナーゼCREは、マウスの遺伝子発現を制御するための新世代のツールを開発するために使用されています[1]。CREは、2つの直接反復ターゲット（LOXP）サイトの再結合を単一のLOXPサイトに媒介し、LOXPサイト（「フロックス」DNA）に隣接するDNAセグメントの併用性切除を行います。このような組換えは、遺伝子の調節とコーディングシーケンスを分離するか、遺伝子の開いている読みフレームを中断するため、発現をブロックするフロックスDNAセグメントを切除することにより、遺伝子を活性化するように機能する可能性があります。逆に、遺伝子の本質的な断片がフロックスされている場合、DNA切除は遺伝子を不活性化できます[3]。in vivoでの遺伝子の活性化または不活性化は、2つの異なる動物を交配することで達成できます。ほとんどの場合、システムの特異性は、CRE発現の厳しい調節に依存しています。ここでは、CRE発現がマウスZona Pellucida 3（ZP3）遺伝子の調節配列によって制御されるマウス系統を説明します。これは、通常、最初の減数分裂除去前に成長する卵母細胞でのみ発現します[4]。標的を含むZP3-コンテマウスでは、標的遺伝子のCREを介した組換えが卵母細胞の100％で明らかに発生することを示しています。さらに、CRE活性は、ほとんどの標的を含むZP3-CREマウスの体性組織では検出されません。このマウスラインの潜在的な用途について説明します。

The site-specific DNA recombinase Cre is being used to develop a new generation of tools for controlling gene expression in mice [1]. Cre mediates the recombination of two directly repeated target (loxP) sites to a single loxP site, with concomitant excision of the DNA segment flanked by the loxP sites (the 'floxed' DNA). Such recombination can function to activate a gene by excising a floxed DNA segment that blocks expression because it either separates the regulatory and coding sequences of the gene [2] or interrupts the gene's open reading frame. Conversely, DNA excision can inactivate a gene if an essential fragment of the gene is floxed [3]. Gene activation or inactivation in vivo can be achieved by mating two different animals, one carrying a 'target gene' with appropriately placed loxP sites and one carrying a cre transgene. In most cases, the specificity of the system is dependent upon stringent regulation of cre expression. We describe here a mouse line in which cre expression is controlled by regulatory sequences from the mouse zona pellucida 3 (Zp3) gene, which is normally expressed exclusively in the growing oocyte prior to the completion of the first meiotic division [4]. We show that in target-bearing Zp3-cre mice, Cre-mediated recombination of the target gene apparently occurs in 100 % of oocytes. Moreover, Cre activity is not detected in the somatic tissues of most target-bearing Zp3-cre mice. Potential uses for this mouse line are discussed.