epstein-barrウイルス核抗原1は、核輸送体カリファヘリンアルファ2と複合体を形成します

エプスタインバーウイルス（EBV）は、いくつかの悪性腫瘍の誘導に関係しています。核抗原1（EBNA1）は、すべてのEBV関連腫瘍で一貫して発現する唯一のウイルスタンパク質です。EBNA1は、感染した細胞のウイルスエピソームの複製と維持に関与しており、トランスジェニックマウスで発癌性活性を示します。ここでは、酵母の「2ハイブリッドシステム」を使用して、eBNA1の細胞パートナーとして核輸送体カリオファリンalpha2の同定を報告します。カリオフェリンアルファ2は、インポートアルファまたはRCH1とも呼ばれます。カリオフェリンalpha2への結合は、核局在化信号を包含するEBNA1のC末端領域を介して媒介されましたが、核局在化信号を備えたEBNA1のクローンはカリオフェリンアルファ2に結合できませんでした。この相互作用は、細菌発現カリファヘリンα2およびカリオフェリンα2特異的モノクローナル抗体を使用した遠心分析によって生化学的に確認されました。EBNA1の核輸送は、N末端が切り捨てられたカリオファリンalpha2の発現によって損なわれました。ショ糖勾配のゾーン速度沈降は、次のことを示しました。（i）EBNA1およびRCH1共局在。（ii）Karyopherin Alpha2と高分子量タンパク質複合体との関連は、EBNA1の存在によって妨げられる可能性があります。

The Epstein-Barr virus (EBV) is implicated in the induction of several malignancies. The nuclear antigen 1 (EBNA1) is the only viral protein that is expressed consistently in all EBV-associated tumors. EBNA1 is involved in the replication and maintenance of the viral episome in the infected cell and exhibits oncogenic activity in transgenic mice. Here we report the identification of the nuclear transporter karyopherin alpha2 as a cellular partner of EBNA1 using the yeast "two-hybrid system." Karyopherin alpha2 is also called importin alpha or Rch1. The binding to karyopherin alpha2 was mediated through a C-terminal region of EBNA1 encompassing the nuclear localization signal, whereas clones of EBNA1 devoid of the nuclear localization signal failed to bind to karyopherin alpha2. The interaction was biochemically confirmed by far-Western analysis using bacterially expressed karyopherin alpha2 and karyopherin alpha2-specific monoclonal antibodies. The nuclear transport of EBNA1 was impaired by expression of N-terminally truncated karyopherin alpha2. Zone velocity sedimentation in a sucrose gradient indicated that: (i) EBNA1 and Rch1 colocalize; and (ii) the association of karyopherin alpha2 with high molecular weight protein complexes might be impeded by the presence of EBNA1.