雌ラットのサイクリングから下垂体細胞に結合するゴナドトロピン貯蔵およびゴナドトロピン放出ホルモンの結合に対するインヒビンの微分効果

ラットの下垂体に関する多くの研究が報告されていることが報告されています。インヒビンはFSHの合成と放出を抑制し、LHの放出を減少させることが報告されています。後者の効果は、GNRHの受容体のダウンレギュレーションに関連しているようです。ここで報告された研究は、ゴナドトロープに対する阻害剤の阻害効果の背後にある細胞の変化を特定し、その効果がゴナドトロープのサブタイプの変化によって媒介されるかどうかを学習しました。2日目と発熱（朝）のラットからの細胞集団を収集し、単一細胞集団に分散させ、組換え32-kDAインチビンまたはブタ濾胞液を含む培地で24時間播種しました。GNRH結合は、固定の前に細胞をビオチン化アナログ（Bio-GnrH）に10分間露出させ、その後アビジン - ペロキシダーゼ標識プロトコルを露出させてアナログ上のビオチンを検出することにより検出されました。並列場では、細胞は、LHまたはFSHベータサブユニットまたは異なる色の反応生成物を持つGHの免疫標識によってさらに同定されました。最も顕著な変化は、発情ラットの細胞で見られました。インヒビンは、母集団のバイオ-GNRH標的細胞の割合を60％減少させ、残りの細胞のバイオ-GNRH標識の面積と密度を減少させました。インヒビンはFSH細胞の割合を30％減少させ、この細胞型によるバイオ-GNRHの結合をほぼ60％減少させました（FSH細胞の83％からFSH細胞の32％に）。インヒビンはまた、FSH細胞の面積とFSH貯蔵の密度を減少させました。LH細胞に対するインヒビンの影響は、細胞の面積とLH貯蔵の密度の減少に限定されていましたが、LH細胞の数ではありませんでした。さらに、Bio-GNRH受容体を伴うLH細胞の割合を84％から40％に減らしました。GHの細胞を分析すると、インヒビンはその割合、面積、またはGH貯蔵庫に影響を与えませんでした。発熱ラットの集団では、インヒビンはGH細胞の割合を38％から21％に引き下げたGH細胞の割合を減少させました。これらのデータは、インヒビンの標的細胞が、LH、FSH、およびGHを含む豊富なマルチホルモン性ゴナドトロープであることを示唆しています。インヒビンの効果はFSH細胞で最も深刻であり、これは、Bihormonal GonadotropesのFSH合成と貯蔵に選択的に影響するか、モノホルモンFSH細胞に影響を与える可能性があることを示唆しています。したがって、その阻害効果の背後にあるメカニズムには、1）バイオ-GNRH標的細胞の割合の減少、2）個々の細胞のバイオグンリング結合部位の領域の減少、および3）FSHの貯蔵の減少が含まれます。FSH細胞の割合。これらの最後の効果は、FSH合成の既知の減少と一致しています。LH分泌に対するインヒビンの効果は、ビホルモン性ゴナドトロープの生体GNRH受容体への影響に続発する可能性があります。

Numerous studies of rat pituitaries have reported that inhibin suppresses the synthesis and release of FSH and decreases the release of LH. The latter effect seems to be related to the down-regulation of receptors for GnRH. The studies reported here identified cellular changes behind the inhibitory effects of inhibin on gonadotropes to learn whether its effects are mediated by changes in subtypes of gonadotropes. Cell populations from diestrous day 2 and proestrous (morning) rats were collected, dispersed to single cell populations, and plated in medium containing either recombinant 32-kDa inhibin or porcine follicular fluid for 24 h. GnRH binding was detected by exposing the cells to a biotinylated analog (Bio-GnRH) for 10 min before fixation, followed by avidin-peroxidase labeling protocols to detect the biotin on the analog. In parallel fields, the cells were further identified by immunolabeling for LH or FSH beta-subunits or for GH with a different colored reaction product. The most striking changes were seen in cells from proestrous rats. Inhibin reduced the percentages of Bio-GnRH target cells in the population by 60% and the area and density of Bio-GnRH label on the remaining cells. Inhibin reduced the percentages of FSH cells by 30% and caused nearly a 60% reduction in the binding of Bio-GnRH by this cell type (from 83% of FSH cells to 32% of FSH cells). Inhibin also reduced the area of FSH cells and the density of FSH stores. Inhibin's effects on LH cells were limited to a reduction in the area of the cells and the density of LH stores, but not the number of LH cells. In addition, it reduced the percentages of LH cells with Bio-GnRH receptors from 84% to 40%. When cells with GH were analyzed, inhibin had no effect on their percentages, areas, or GH stores. In populations from proestrous rats, inhibin reduced the percentages of GH cells with Bio-GnRH binding from 38% to 21%. These data suggest that inhibin's target cell is the abundant multihormonal gonadotrope that contains LH, FSH, and GH and predominates during proestrus. Inhibin's effects are most severe on FSH cells, which suggests that it may either selectively affect FSH synthesis and stores in bihormonal gonadotropes and/or affect monohormonal FSH cells. Thus, mechanisms behind its inhibitory effects include 1) a reduction in the percentage of Bio-GnRH target cells, 2) a reduction in the area of Bio-GnRH-binding sites on individual cells, and 3) a reduction in the stores of FSH and the percentages of FSH cells. These last effects are consistent with known reductions in FSH synthesis. The effects of inhibin on LH secretion may be secondary to the effects on Bio-GnRH receptors in bihormonal gonadotropes.