マウスでの移植のための子宮調製は、エストロゲン応答性フィンガータンパク質およびエストロゲン受容体の座標発現に関連しています

エストロゲン応答性フィンガータンパク質（EFP）は、薬指含有タンパク質のメンバーです。これは、標的器官のエストロゲン作用を増幅すると推測される推定転写調節因子です。本研究では、北およびin situハイブリダイゼーションによる、閉塞マウス子宮（1〜8日目）におけるEFP mRNAの時間的および細胞型特異的発現を調べました。以前の観察と一致して、子宮RNAサンプルで6.0-kb転写産物が検出されました。子宮RNA全体におけるEFP mRNAの定常状態レベルは、閉塞期間中に適度な変動を示しました。ただし、in situハイブリダイゼーションの結果は、周囲植物子宮におけるEFP mRNAの細胞特異的分布を時間的に示しました。妊娠の1〜2日目に、子宮内腔および腺上皮でEFP mRNAの異なる自己放射線造影信号が検出されました。しかし、3日目と4日目には、上皮内でのその存在に加えて、EFP mRNAの蓄積が間質細胞で発生しました。5日目に移植を開始した後、移植室をすぐに周囲の間質細胞で信号強度が高かった。ただし、6〜8日目には、EFP mRNAは脱落膜全体に局在していました。卵巣ステロイドがこの遺伝子の子宮発現に影響するかどうかを判断するために、EFP mRNAの細胞特異的局在化は、エストラジオール-17ベータ（E2）またはプロゲステロン（P4）の注射の後、12時間および24時間後の成体卵巣切除マウス子宮で検査されました。。E2を注入すると、管腔および腺上皮のEFP mRNAレベルがわずかに増加しましたが、P4の注射後に間質細胞の蓄積が発生しました。これらの結果は、EFPがP4/E2を介した子宮細胞の増殖および/または分化に関与していることを示唆しています。以前の研究では、EFPが標的細胞のエストロゲン受容体（ER）と共局在していることが示されていたため、免疫組織化学により、閉塞マウス子宮内のERの細胞特異的核局在も調べました。妊娠の1〜2日目には、核染色は管腔上皮と腺上皮で異なっていました。対照的に、3〜4日目に間質細胞で核染色が認められました。しかし、腺上皮はこの期間中に明確な染色を示しました。5日目には、中膜部位の内腔を囲む間質細胞がER陽性でした。6〜8日目には、核染色の強度は非常に低く、管腔上皮に隣接する細胞に限定されていました。移植前（1〜4日目）における特定の子宮細胞におけるEFPおよびERの座標発現は、移植のための子宮の調製におけるエストロゲンの絶対要件と一致していました。子宮の調製に必要なエストロゲンの量はP4と比較して非常に極小であるため、これらの結果は、ERとのEFPの共発現が、移植中の子宮の増殖および/または分化に必要なエストロゲン効果の増幅に関与していることを示唆しています。対照的に、移植後（5〜8日目）におけるEFPおよびERの見かけの発現は、エストロゲンではなく、P4に対する脱落膜化プロセスの一次依存性を示唆しています。

Estrogen-responsive finger protein (Efp) is a member of the RING finger-containing proteins. It is a putative transcription regulator that is speculated to amplify estrogen actions in the target organs. The present study examined the temporal and cell-type specific expression of Efp mRNA in the periimplantation mouse uterus (days 1-8) by Northern and in situ hybridization. Consistent with previous observation, a 6.0-kb transcript was detected in uterine RNA samples. The steady-state levels of Efp mRNA in whole uterine RNAs exhibited modest fluctuations during the periimplantation period. However, results of in situ hybridization showed cell-specific distribution of Efp mRNA in the periimplantation uterus in a temporal manner. On days 1-2 of pregnancy, distinct autoradiographic signals for Efp mRNA were detected in uterine luminal and glandular epithelia. However, on days 3 and 4, the accumulation of Efp mRNA occurred in stromal cells, in addition to its presence in the epithelium. After initiation of implantation on day 5, signal intensity was higher in stromal cells immediately surrounding the implantation chamber. However, on days 6-8, Efp mRNA was localized throughout the deciduum. To determine whether ovarian steroids influence the uterine expression of this gene, cell-specific localization of Efp mRNA was examined in the adult ovariectomized mouse uterus at 12 hr and 24 hr after an injection of estradiol-17 beta (E2) or progesterone (P4). An injection of E2 caused a modest increase in Efp mRNA levels in the luminal and glandular epithelia, while stromal cell accumulation occurred after an injection of P4. These results suggest that Efp is involved in P4/E2-mediated uterine cellular proliferation and/or differentiation. Since previous studies showed that Efp is colocalized with estrogen receptor (ER) in target cells, we also examined the cell-specific nuclear localization of ER in the periimplantation mouse uterus by immunohistochemistry. On days 1-2 of pregnancy, nuclear staining was distinct in the luminal epithelium and glandular epithelium. In contrast, nuclear staining was noted in stromal cells on days 3-4. However, glandular epithelium showed distinct staining during this period. On day 5, stromal cells surrounding the lumen at the mesometrial site were ER-positive. On days 6-8, the intensity of nuclear staining was very low, and limited to the cells adjacent to the luminal epithelium. The coordinate expression of Efp and ER in specific uterine cells during the preimplantation period (days 1-4) was consistent with the absolute requirement for estrogen in the preparation of the uterus for implantation. Since the amount of estrogen required for the preparation of the uterus is minuscule as compared to that of P4, these results suggest that the coexpression of Efp with ER is involved in amplifying the estrogen effects required for uterine cell proliferation and/or differentiation during implantation. In contrast, discoordinate expression of Efp and ER during the postimplantation period (days 5-8) suggests primary dependence of the decidualization process on P4, but not estrogen.