直接プラズマおよび尿注射のための制限されたアクセスC18前柱式によるオンライン固相抽出による液体クロマトグラフィマス分光測定

このホワイトペーパーでは、生物学的サンプルの分析のための液体クロマトグラフィマス分析（LC-MS）による制限されたアクセスサポートに基づいた、固相抽出のオンライン結合について説明します。このシステムは、血漿分析のためにコルチゾールとプレドニゾロンと尿分析のためにアラキドン酸でテストされました。25ミクロンC18アルキルジオールサポートが詰め込まれた前umnは、直接血漿または尿注射に使用されます。カラムスイッチング技術を使用して、Precolumnに濃縮された分析物は、転送損失なしに分析カラムに溶出されます。オンラインハートカット技術が採用され、LCカラムから溶出する分析物を含む画分のみがMSに向けられ、LC-MSインターフェイスとイオンソースを汚染から保護します。システム全体が並列モードで動作します。つまり、サンプル前処理とLC-MS分析は同時に実行され、可能な限り短い分析時間を提供します。必要な唯一のオフラインサンプル前処理ステップは、微粒子物質を除去するための遠心分離でした。完全に自動化されたシステムでは、尿中のコルチゾールと尿中のアラキドン酸について、それぞれ5および9.5分の総分析時間が達成されました。コルチゾールと関連する化合物は、2 ng/mlのプレドニゾロン（制限されたアクセス前症の100マイクロリットルの直接注入）の検出限界を持つ血漿から定量的に回収されました。

In this paper, the on-line coupling of solid-phase extraction, based on a restricted-access support with liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS), for the analysis of biological samples is described. The system was tested with cortisol and prednisolone for plasma analysis and arachidonic acid for urine analysis. A precolumn packed with a 25-micron C18 alkyl-diol support is used for direct plasma or urine injection. Using column-switching techniques, the analytes enriched on the precolumn are eluted to the analytical column without transfer loss. An on-line heart-cut technique was employed and only the analyte-containing fraction eluting from the LC column is directed to the MS to protect the LC-MS interface and ion-source from contamination. The whole system is operated in a parallel mode, that is, sample pre-treatment and LC-MS analysis are performed simultaneously to provide the shortest possible analysis time. The only off-line sample pre-treatment step required was centrifugation to remove particulate matter. With the fully automated system, total analysis times of 5 and 9.5 min were achieved for cortisol in serum and arachidonic acid in urine, respectively. Cortisol and related compounds were quantitatively recovered from plasma with a detection limit for prednisolone (direct injection of 100 microliters on restricted-access precolumn) of 2 ng/ml.