Rhogdigamma：脳と膵臓で優先的な発現を持つRhoタンパク質のGDP-浸透阻害剤

GDP-ディソシエーション阻害剤（GDI）は、GTPaseの活性化の調節において主要な役割を果たし、GTPaseの細胞区画化にも重要である可能性があります。RhogdiとGDI/D4は、GTPaseのRho-Subfamilyで現在知られている2つのGDIです。彼らのcDNAを使用して、ストリンジェンシーの低下で人間の脳cDNAライブラリーをスクリーニングし、脳と膵臓の高レベルで優先的に発現する相同cDNAをクローン化しました。Rhogdigammaという名前の予測タンパク質は、GDI/D4とRhogdiと約50％同一です。Rhogdiと比較して親和性が低いCdc42とRhoaに結合し、Rac1、Rac2、またはRasに結合しません。Rhogdigammaは、CDC42のGDIとして機能しますが、Rhogdiよりも約20倍効率が低くなります。免疫組織化学的研究では、細胞質小胞の核の周りの濃度を伴う細胞質におけるタンパク質のびまん性穿刺分布が示されました。ベビーハムスター腎臓細胞におけるタンパク質の過剰発現により、細胞はストレス繊維の喪失とともに切り上げました。他の2つのRhogdisには見られないRhogdigammaの明確な疎水性アミノ末端は、GDIの特定の膜コンパートメントへの局在化のメカニズムを提供し、RhogdiまたはGDI/D4とは異なる機能を決定することができます。私たちの結果は、Rho関連GTPaseのGDIファミリーが存在すること、およびそれらが結合親和性、ターゲット特異性、および組織の発現が異なるという証拠を提供します。RhogdiをRhogdialphaと名前が変更され、Gdid4をRhogdibetaと改名することを提案します。新しいGDIは、この重要なクラスの調節タンパク質の調査範囲を広げる必要があります。

GDP-dissociation inhibitors (GDIs) play a primary role in modulating the activation of GTPases and may also be critical for the cellular compartmentalization of GTPases. RhoGDI and GDI/D4 are two currently known GDIs for the Rho-subfamily of GTPases. Using their cDNAs to screen a human brain cDNA library under low stringency, we have cloned a homologous cDNA preferentially expressed at high levels in brain and pancreas. The predicted protein, named RhoGDIgamma, is approximately 50% identical to GDI/D4 and RhoGDI. It binds to CDC42 and RhoA with less affinity compared with RhoGDI and does not bind with Rac1, Rac2, or Ras. RhoGDIgamma functions as a GDI for CDC42 but with approximately 20 times less efficiency than RhoGDI. Immunohistochemical studies showed a diffuse punctate distribution of the protein in the cytoplasm with concentration around the nucleus in cytoplasmic vesicles. Overexpression of the protein in baby hamster kidney cells caused the cells to round up with loss of stress fibers. A distinct hydrophobic amino terminus in RhoGDIgamma, not seen in the other two RhoGDIs, could provide a mechanism for localization of the GDI to specific membranous compartment thus determining function distinct from RhoGDI or GDI/D4. Our results provide evidence that there is a family of GDIs for the Rho-related GTPases and that they differ in binding affinity, target specificity, and tissue expression. We propose that RhoGDI be renamed RhoGDIalpha and GDID4 be renamed RhoGDIbeta. The new GDI should widen the scope of investigation of this important class of regulatory protein.