グリコフォリンAに対して向けられた一連の新しいモノクローナル抗体の細かい特性

目的：グリコフォリンA（GPA）およびB（GPB）は、ヒト赤血球（RBC）膜の主要なシログリコタンパク質です。GPAおよびGPBの分析のためのツールを準備するために、GPAのエピトープを特定した一連の新しいモノクローナル抗体（mAb）を生成しました。 方法：グリコフォリンA（GPA）に向けられた7つのマウスモノクローナル抗体は、未処理および酵素処理のヒト赤血球の凝集、化学修飾糖派、およびGPAからのペプチドを使用した凝集の阻害、イムブロッティング、および合成のペプト化のペプト化、およびa絶球菌の凝集の阻害によって完全に特徴付けられました。 結果：抗体は、GPAの4つの異なる部分にあるエピトープを特定します。（1）NAM13-6D2は、N血液型抗原を運ぶGPAおよびGPBのN末端部分に結合します。（2）NAM26-3F4は、アミノ酸6-26に対応するGPAとGPBの相同部分を認識します。（3）NAM10-2H12、NAM16-IB10、およびNAM10-6G4は、GPAのアミノ酸配列38-45に特異的です。（4）NAM37-5F4およびNAM13-4E4は、GPAの細胞内ポニオンにあるアミノ酸残基119-124に結合します。 結論：これらの抗体は、異なる細胞および組織のGPAおよび関連分子を調査するための正確なツールを表しています。

OBJECTIVES: Glycophorins A (GPA) and B (GPB) are the major sialoglycoproteins of the human erythrocyte (RBC) membrane. To prepare tools for the analysis of GPA and GPB, we produced a series of new monoclonal antibodies (mAbs) that identified epitopes of GPA. METHODS: Seven murine monoclonal antibodies directed to glycophorin A (GPA) were fully characterized by agglutination of untreated and enzyme-treated human erythrocytes, inhibition of agglutination using chemically modified glycophorins and peptides from GPA, immunoblotting, and binding to synthetic peptides on plastic pins. RESULTS: The antibodies identify epitopes located on four different portions of GPA. (1) NaM13-6D2 binds to the N-terminal portion of GPA and GPB carrying the N blood group antigen; (2) NaM26-3F4 recognizes the homologous portion of GPA and GPB corresponding to their amino acids 6-26; (3) NaM10-2H12, NaM16-IB10 and NaM10-6G4 are specific for the amino acid sequence 38-45 of GPA; and (4) NaM37-5F4 and NaM13-4E4 bind to the amino acid residues 119-124 located on the intracellular ponion of GPA. CONCLUSION: These antibodies represent precise tools to investigate GPA and related molecules in different cells and tissues.