逆行性蛍光トレーサーによる持続性ニューロン標識：高速青、フルオロゴールド、およびさまざまなデキストランのコンジュゲートの比較

蛍光トレーサーによる逆行性ニューロン標識の永続性は、高速青、フルオロゴールド、ミニルビー、フルオロ - ルビー、フルオロエメラルドによる、トレーサー塗布後1、4、12、および24週間の成体ラット脊髄モーターコーノンで検査を検査しました。筋神経。1週間後、最大数の逆行性標識運動ニューロンがミニルビー、フルオロゴールド、フルオロルビーで発見されましたが、フルオロエメラルドはより少ない数の標識細胞を生成しました。生存時間が長くなると、これらのトレーサーはすべて、標識ニューロンの数の著しい減少を示しました。また、高速青は1週間後に非常に効率的な染色を生成し、さらに、研究された期間全体で高速青色標識細胞の数は一定のままでした。また、高速青に曝露した胚脊髄組織でも。ラベルは、成体脊髄への移植後少なくとも6か月間持続しました。高速ブルーとフルオロゴールド、ミニルビー、フルオロルビー、またはフルオロエメラルドを組み合わせた二重標識実験により、これらの物質はすべて非毒性があり、後者のトレーサーによって標識されたニューロンの数の時間関連の減少が示されました。染料の分解または漏れによる。したがって、高速青は、長期実験で運動核標識に最適なトレーサーになりますが、他のトレーサーの使用は限られた期間の実験に制限されるべきです。

The permanence of retrograde neuronal labeling by the fluorescent tracers Fast Blue, Fluoro-Gold, Mini-Ruby, Fluoro-Ruby and Fluoro-Emerald was investigated in adult rat spinal motorneurons at 1, 4, 12 and 24 weeks after tracer application to a transected muscle nerve. After 1 week, the largest number of retrogradely labeled motoneurons was found with Mini-Ruby, Fluoro-Gold and Fluoro-Ruby, while Fluoro-Emerald yielded a smaller number of labeled cells. With increasing survival time, all of these tracers exhibited a marked decrease in the number of labeled neurons. Fast Blue also produced very efficient staining after 1 week and, in addition, the number of Fast Blue-labeled cells remained constant over the entire time period studied. Also in embryonic spinal cord tissue exposed to Fast Blue. the label persisted for at least 6 months after transplantation into adult spinal cord. Double-labeling experiments combining Fast Blue with Fluoro-Gold, Mini-Ruby, Fluoro-Ruby or Fluoro-Emerald showed that all these substances were non-toxic and that the time-related decrease in the number of neurons labeled by the latter tracers was due to degradation or leakage of the dyes. Thus, Fast Blue would be the tracer of choice for motoneuronal labeling in long-term experiments, whereas the usage of the other tracers should be restricted to experiments of limited duration.