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シロイヌナズナの植物は、37度Cで2時間前処理された植物は、45度Cで致命的な熱ショックを生存することができます。微分ディスプレイ逆転写酵素-PCR（DDRT-PCR）は、条件で特異的に発現するmRNAに対応するMRNASに対応するDNAフラグメントをクローンするために使用しました。誘導された熱耐性または熱耐性の発現の。これらのDDRT-PCRフラグメントの1つは、低分子量（LMW）熱ショックタンパク質（HSP）の遺伝子であるシーケンスATHSP23.5を含むゲノムクローンPAT1.3EXの分離を可能にしました。ATHSP23.5はシロイヌナズナのゲノムの低いまたは単一コピーであり、そのオープンリーディングフレームは137 bpのイントロンによって中断されます。シーケンスの分析は、ATHSP23.5がミトコンドリオンを標的とすることを示唆しています。ATHSP23.5 mRNAの定常状態レベルは、熱処理に応じて大幅に変化し、熱ショックで増加し（22度Cから37度Cに移動）、熱耐性の発現中にさらに増加します（22度CからCから22度への移動37度C、その後45度C）。急激なストレスの後、発現は低かった（22度Cから45度Cから45度）。この挙動は、37度Cで高レベルで存在する他のLMW HSP mRNAで観察された動作とは異なりましたが、熱耐性の発現の条件では有意に増加しませんでした。程度C. ATHSP23.5 mRNAのレトロトランスクリックに続いて、イントロンを含む2つのプライマーによる増幅により、ほぼ完全な長さのcDNA配列の分離が可能になりました。C-> 37度Cおよび条件22度C-> 45度Cから得られた条件22度Cから得られた2つのcDNAの配列分析は、どちらの場合もイントロンが正しくスプライシングされたことを示唆しました。高温での生存における正しいイントロンスプライシングの重要性と、熱耐性の誘導と発現におけるミトコンドリアHSPの役割について説明します。
シロイヌナズナの植物は、37度Cで2時間前処理された植物は、45度Cで致命的な熱ショックを生存することができます。微分ディスプレイ逆転写酵素-PCR（DDRT-PCR）は、条件で特異的に発現するmRNAに対応するMRNASに対応するDNAフラグメントをクローンするために使用しました。誘導された熱耐性または熱耐性の発現の。これらのDDRT-PCRフラグメントの1つは、低分子量（LMW）熱ショックタンパク質（HSP）の遺伝子であるシーケンスATHSP23.5を含むゲノムクローンPAT1.3EXの分離を可能にしました。ATHSP23.5はシロイヌナズナのゲノムの低いまたは単一コピーであり、そのオープンリーディングフレームは137 bpのイントロンによって中断されます。シーケンスの分析は、ATHSP23.5がミトコンドリオンを標的とすることを示唆しています。ATHSP23.5 mRNAの定常状態レベルは、熱処理に応じて大幅に変化し、熱ショックで増加し（22度Cから37度Cに移動）、熱耐性の発現中にさらに増加します（22度CからCから22度への移動37度C、その後45度C）。急激なストレスの後、発現は低かった（22度Cから45度Cから45度）。この挙動は、37度Cで高レベルで存在する他のLMW HSP mRNAで観察された動作とは異なりましたが、熱耐性の発現の条件では有意に増加しませんでした。程度C. ATHSP23.5 mRNAのレトロトランスクリックに続いて、イントロンを含む2つのプライマーによる増幅により、ほぼ完全な長さのcDNA配列の分離が可能になりました。C-> 37度Cおよび条件22度C-> 45度Cから得られた条件22度Cから得られた2つのcDNAの配列分析は、どちらの場合もイントロンが正しくスプライシングされたことを示唆しました。高温での生存における正しいイントロンスプライシングの重要性と、熱耐性の誘導と発現におけるミトコンドリアHSPの役割について説明します。
Plants of Arabidopsis thaliana pre-treated at 37 degrees C for 2 h can survive an otherwise lethal heat shock at 45 degrees C. Differential display reverse transcriptase-PCR (DDRT-PCR) was utilized to clone DNA fragments corresponding to mRNAs specifically expressed in conditions of induced thermotolerance or of expression of thermotolerance. One of these DDRT-PCR fragments enabled the isolation of a genomic clone pAt1.3EX, containing the sequence Athsp23.5, the gene for a low-molecular-weight (LMW) heat shock protein (HSP), AtHSP23.5. Athsp23.5 is low- or single-copy in the Arabidopsis genome and its open reading frame is interrupted by a 137 bp intron. Analysis of the sequence suggests AtHSP23.5 is targeted to the mitochondrion. The steady-state level of the AtHSP23.5 mRNA varied significantly according to the heat treatment, increasing on heat shock (transfer from 22 degrees C to 37 degrees C), with a further increase during expression of thermotolerance (transfer from 22 degrees C to 37 degrees C and then to 45 degrees C). Expression was low after an abrupt stress (from 22 degrees C to 45 degrees C). This behaviour was different from that observed for other LMW HSP mRNAs that were present at high level at 37 degrees C, but did not increase significantly in condition of expression of thermotolerance, and reached a considerable steady-state level also during the abrupt stress at 45 degrees C. The retrotranscription of AtHSP23.5 mRNA followed by amplification with two primers encompassing the intron allowed for the isolation of an almost full-length cDNA sequence. The sequence analysis of the two cDNAs obtained from condition 22 degrees C-->37 degrees C and condition 22 degrees C-->45 degrees C suggested that in both cases the intron had been correctly spliced. The importance of correct intron splicing in survival at high temperatures and the role of mitochondrial HSP in induction and expression of thermotolerance are discussed.
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