ラット脳におけるプロエンケファリン遺伝子発現に対するモルヒネの効果

以前の研究は、モルヒネの急性注射が脳内のオピオイドペプチドとそのmRNAのレベルに影響を与えないことを示しています。ただし、mRNAの大きなプールの存在と離職率の反対の変化の可能性により、mRNAレベルを調べることにより、遺伝子転写の一時的かつ比較的小さな変化を視覚化することは困難なことがよくあります。したがって、この研究では、モルヒネ投与後のラット脳のプロエンケファリン（PPE）mRNA（ヘテロ核RNA、hnRNA）の主要な転写産物を測定するためにイントロン配列に向けられたプローブを使用したin situハイブリダイゼーションをこの研究で使用しました。PPE遺伝子のAとBの両方のイントロンに対するプローブのハイブリダイゼーション信号の分布は同一であり、分布PPE mRNAと一致しました。したがって、このアッセイの感度を高めるために、両方のプローブが同時にハイブリダイズされました。女性および雄のスプラグドーリーラットにgonadectomized化され、モルヒネ（10 mg/kg、SC）を注入しました。線条体、嗅覚結節（OT）、およびnのPPE mRNAレベルの変化は検出されませんでした。Morphine投与後のいつでもAscumbens Core（NAC）。ただし、モルヒネ注射の0.5時間から24時間まで、NACおよびOTのPPE HNRNAのレベルは、背側線条体では大幅に減少しませんでした。C-FOS mRNAのレベルは、モルヒネ注射後の背側線条体のみを増加させました。これらのデータは、モルヒネ投与がオピオイドペプチド遺伝子転写を急性に変化させる可能性があることを示しています。単一のモルヒネ注射後24時間のPPE hnRNAレベルの観察された減少は、急性および慢性依存の発生におけるその重要性を示している可能性があります。しかし、mRNAの定常状態レベルが変化しなかったため、モルヒネの急性効果の用語でのPPE遺伝子転写におけるこれらの変化の重要性は明らかではありません。

Previous studies indicate that an acute injection of morphine does not effect the level of opioid peptides and their mRNA in the brain. However, due to the presence of a large pool of mRNA and possible opposing changes in turnover rate it is often difficult to visualize the transitory and relatively small alterations in gene transcription by examining mRNA level. Therefore, in situ hybridization with probes directed against intronic sequences to measure the primary transcript of proenkephalin (PPE) mRNA (heteronucleic RNA, hnRNA) in the rat brain following morphine administration was used in this study. The distribution of the hybridization signal of probes against both the A and B intron of the PPE gene were identical and coincide with the distribution PPE mRNA. Thus, to increase the sensitivity of this assay both probes were concurrently hybridized. Female and male Sprague-Dawley rats were gonadectomized and injected with morphine (10 mg/kg, SC). We detected no changes in PPE mRNA levels in the striatum, olfactory tubercle (OT) and n. accumbens core (NAC) at any time following morphine administration. However, from 0.5 h until 24 h following morphine injection, the levels of PPE hnRNA in NAC and OT but not in the dorsal striatum were significantly decreased. The level of c-fos mRNA was increased only the dorsal striatum following morphine injections. These data show that morphine administration can acutely change opioid peptide gene transcription. The observed decrease of PPE hnRNA levels for 24 h following a single morphine injection may indicate its importance for the development of acute and chronic dependence. However, the significance of these alterations in PPE gene transcription in term of the acute effect of morphine is not clear, because the steady-state level of mRNA was not changed.