AIB残基で修飾されたペプチドを使用して、マラリア原虫抗原に対するヒト抗体の検出の改善

17-MERシーケンスは、ペプチドの立体構造と自然発達抗体に対する抗原性の両方に末端端の修飾の影響を研究するためのモデルとして選択されました。このシーケンスは、HAMの免疫原性免疫原性の熱帯熱マラリア原虫肝臓抗原（LSA-1）の長い繰り返し領域で見られるタンデムの反復モチーフに対応していました。私たちのモデルペプチドは、イオン化不可の末端または非固定末端で合成されるか、ヘリックス促進残基のα-アミノイソ酪酸（AIB）の導入により両四肢で修飾されました。ヘリカルの寄与は、イオン化可能な端を持つ17のアミノ酸配列に存在しないが、非固定末端が導入されたときに検出可能であり、AIB修飾類似体で劇的に増加した。イオン化可能な端の存在は、ヒト血清に対する反応性を完全に廃止しました。そうでなければ、ペプチドを有効端を所有していることで検出できます。AIB残基による修飾は、溶液中の抗原に有害でも有益でもありませんでしたが、ELISAの固相抗原として使用すると、特定の抗体検出の感度が改善されました。

A 17-mer sequence was selected as a model to study the influence of modifications of terminal ends both on the conformational of a peptide and on its antigenicity towards naturally developing antibodies. This sequence corresponded to a tandemly repeated motif, found in a long repetitive region, with high helical propensity, of a Plasmodium falciparum liver-stage antigen (LSA-1), immunogenic in man. Our model peptide was synthesized with ionizable or non-ionizable ends, or modified in both extremities by introduction of the helix-promoting residue alpha-aminoisobutyric acid (Aib). Helical contribution, absent in the 17 amino-acid sequence possessing ionizable ends, was detectable when non-ionizable ends were introduced, and dramatically increased in the Aib-modified analogue. The presence of ionizable ends totally abolished reactivity towards human sera, otherwise detectable with the peptide possessing non-ionizable ends. While modification by Aib residues was neither detrimental nor beneficial to antigenicity in solution, it clearly resulted in an improved sensitivity of the specific antibody detection when used as solid-phase antigen in ELISA.