ウロカン酸異性体の高性能液体クロマトグラフィー測定と、自然に露出した皮膚と自然に保護された皮膚におけるその比率

ヒト皮膚からのトランスウロカン酸とシス - ウロカン酸のサンプリングと抽出、およびこれらの異性体のその後の高性能液クロマトグラフィ測定の方法を開発しました。サンプリングには、セロハン接着テープを皮膚に10秒間塗布することが含まれます。ウロカン酸異性体は、KOH溶液にテープを浸すことにより、完全に抽出されました。HPLCカラムは、1 g/Lヘプトゥルホン酸ナトリウム（pH 3.7） - アセトニトリル（93：7、v/v）を含む20 mMジヒドロゲンリン酸カリウムで溶出したTosoh ODS 80TS（250x4.6 mm I.D.、7ミクロム平均粒子サイズ）で溶出されました。1.0 ml/minのフローレート。異性体は、264 nmのUV吸光度によって検出されました。この手法は、体のさまざまな部位でのヒト皮膚のトランスウロカン酸/シス - ウロカン酸の比を分析するために使用されました。この比率は、自然に露出した皮膚では低く、自然に保護された皮膚で高いことがわかりました。

We have developed methods for sampling and extraction of trans-urocanic acid and cis-urocanic acid from human skin, and subsequent high-performance liquid chromatographic measurement of these isomers. Sampling involves applying cellophane adhesive tape to the skin for 10 s. Urocanic acid isomers were completely extracted by immersing the tape in KOH solution. The HPLC column was a Tosoh ODS 80TS (250x4.6 mm I.D., 7 microm average particle size) eluted with 20 mM potassium dihydrogenphosphate containing 1 g/l sodium heptanesulphonate (pH 3.7)-acetonitrile (93:7, v/v) at a flow-rate of 1.0 ml/min. The isomers were detected by UV absorbance at 264 nm. This technique was used to analyze the ratio of trans-urocanic acid/cis-urocanic acid on human skin at various sites on the body. It was found that the ratio was low in naturally light-exposed skin and high in naturally shielded skin.