著名医師による解説が無料で読めます
すると翻訳の精度が向上します
グアニン修飾7,8-ジヒドロ-8-オキソグアニン（8-オキソグ）は、有酸素生物のゲノムの高頻度で自然に形成される強力な前期療法病変です。分子クローニングと機能分析により、8-オキソグ除去のヒトDNA修復グリコシラーゼ、HOGH1（ヒト酵母OGG1ホモログ）を特徴付けました。Escherichia coli（FPG Muty）の修復不足した突然変異体ひずみにおけるヒトcDNAの発現は、自発的変異頻度をほぼ正常レベルに抑制しました。HOGH1酵素は、緑色蛍光タンパク質に融合したHOGH1の構造によってトランスフェクトされた細胞の核に局在しました。酵素精製により、38 kDaのタンパク質が得られ、DNAからホルムアミドピリミジンと8-オキソグの両方を除去しました。HOGH1の酵素活性は、DNAの4つの正常塩基のそれぞれの反対側の8-オキソグまたはAbasic部位の単一残基を含むDNAで分析されました。Cの反対側の8-オキソグの切除が最も効率的であり、その後、ベータ除去を介した鎖切断が続きました。ただし、誤った問題（8-オキソグ：t> g> a）からの8-オキソグの有意な除去も実証されましたが、基本的に関連する鎖切断反応はありませんでした。ABASIC部位DNAを使用したアッセイは、8酸素残基の事前除去に関係なく、鎖切断が反対側の鎖におけるCの存在に実際に依存することを示しました。したがって、鎖切開は修復完了が正しいベース挿入をもたらす場合にのみ行われるように見えますが、ミスペアからの切除によりストランドの連続性が保存され、したがって、脚本後修復メカニズムによるエラーのない修正が可能になります。
グアニン修飾7,8-ジヒドロ-8-オキソグアニン（8-オキソグ）は、有酸素生物のゲノムの高頻度で自然に形成される強力な前期療法病変です。分子クローニングと機能分析により、8-オキソグ除去のヒトDNA修復グリコシラーゼ、HOGH1（ヒト酵母OGG1ホモログ）を特徴付けました。Escherichia coli（FPG Muty）の修復不足した突然変異体ひずみにおけるヒトcDNAの発現は、自発的変異頻度をほぼ正常レベルに抑制しました。HOGH1酵素は、緑色蛍光タンパク質に融合したHOGH1の構造によってトランスフェクトされた細胞の核に局在しました。酵素精製により、38 kDaのタンパク質が得られ、DNAからホルムアミドピリミジンと8-オキソグの両方を除去しました。HOGH1の酵素活性は、DNAの4つの正常塩基のそれぞれの反対側の8-オキソグまたはAbasic部位の単一残基を含むDNAで分析されました。Cの反対側の8-オキソグの切除が最も効率的であり、その後、ベータ除去を介した鎖切断が続きました。ただし、誤った問題（8-オキソグ：t> g> a）からの8-オキソグの有意な除去も実証されましたが、基本的に関連する鎖切断反応はありませんでした。ABASIC部位DNAを使用したアッセイは、8酸素残基の事前除去に関係なく、鎖切断が反対側の鎖におけるCの存在に実際に依存することを示しました。したがって、鎖切開は修復完了が正しいベース挿入をもたらす場合にのみ行われるように見えますが、ミスペアからの切除によりストランドの連続性が保存され、したがって、脚本後修復メカニズムによるエラーのない修正が可能になります。
The guanine modification 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG) is a potent premutagenic lesion formed spontaneously at high frequencies in the genomes of aerobic organisms. We have characterized a human DNA repair glycosylase for 8-oxoG removal, hOGH1 (human yeast OGG1 homologue), by molecular cloning and functional analysis. Expression of the human cDNA in a repair deficient mutator strain of Escherichia coli (fpg mutY) suppressed the spontaneous mutation frequency to almost normal levels. The hOGH1 enzyme was localized to the nucleus in cells transfected by constructs of hOGH1 fused to green fluorescent protein. Enzyme purification yielded a protein of 38 kDa removing both formamidopyrimidines and 8-oxoG from DNA. The enzymatic activities of hOGH1 was analysed on DNA containing single residues of 8-oxoG or abasic sites opposite each of the four normal bases in DNA. Excision of 8-oxoG opposite C was the most efficient and was followed by strand cleavage via beta-elimination. However, significant removal of 8-oxoG from mispairs (8-oxoG: T >G >A) was also demonstrated, but essentially without an associated strand cleavage reaction. Assays with abasic site DNA showed that strand cleavage was indeed dependent on the presence of C in the opposite strand, irrespective of the prior removal of an 8-oxoG residue. It thus appears that strand incisions are made only if repair completion results in correct base insertion, whereas excision from mispairs preserves strand continuity and hence allows for error-free correction by a postreplicational repair mechanism.
医師のための臨床サポートサービス
ヒポクラ x マイナビのご紹介
無料会員登録していただくと、さらに便利で効率的な検索が可能になります。