水性環境におけるアルテミシニンの安定性: エールリッヒ腹水腫瘍細胞に対する細胞傷害作用への影響

我々は最近、アルテミシニンがエールリッヒ腹水腫瘍細胞に対して細胞毒性があることを示しました。この研究の目的は、その細胞毒性作用を参照して、インビトロのエールリッヒ腹水腫瘍細胞系（10％ウシ胎児血清（RPMI/FBS）を添加したRPMI 1640細胞培養培地）の水性環境におけるこの化合物の安定性を調査することでした。文献データは、アルテミシニンがFe2+と反応して、反応性中間体を生成し、主要な最終生成物としてアルテミシニンGを残すことを示しています。現在の研究は、アルテミシニンを過剰に添加しただけであることを示しました。蒸留水、リン酸緩衝食塩水 (PBS)、および RPMI/FBS 中でアルテミシニンに Fe2+ を加え、24 時間インキュベートすると、アルテミシニンが分解され、アルテミシニン G が生成しました。Fe2+ が添加されなかった場合、HPLC 分析の結果は、細胞の有無にかかわらず、37℃で 30 分間、蒸留水および RPMI/FBS からアルテミシニンが完全に回収されたことを示しました。さらに、細胞毒性アッセイの前に、細胞の存在下または非存在下で RPMI/FBS 中でアルテミシニンを 24 時間インキュベートしても、その細胞毒性作用は変化しなかったが、これらの結果に基づいて、腫瘍細胞に対する細胞毒性は、アルテミシニンおよび誘導体のプールの存在によって引き起こされることが示唆される。(ヘム) Fe2+ はフリーラジカルまたは求電子中間体、あるいはその両方を生成する前提条件です。

We have recently shown artemisinin to be cytotoxic against Ehrlich ascites tumour cells. The aim of this study was to investigate the stability of this compound in the aqueous environment of the in-vitro Ehrlich ascites tumour cell system (RPMI 1640 cell culture medium supplemented with 10% foetal bovine serum (RPMI/FBS) with reference to its cytotoxic action. Literature data show that artemisinin can react with Fe2+ yielding reactive intermediates leaving artemisinin G as a major end-product. The current study showed that only excess addition of Fe2+ to artemisinin in distilled water, phosphate-buffered saline (PBS) and RPMI/FBS and incubation for 24 h led to degradation of artemisinin and yielded artemisinin G. If Fe2+ was not added results from HPLC analysis were indicative of complete recovery of artemisinin from distilled water and RPMI/FBS, with or without cells, at 37 degrees C for at least 24 h. In addition, incubation of artemisinin in RPMI/FBS with or without cells at 37 degrees C for 24 h before cytotoxicity assay did not change its cytotoxic action. On the basis of these results, we suggest that cytotoxicity to tumour cells was caused by unchanged artemisinin. This is not so for the antimalarial activity of artemisinin and derivatives, for which the presence of a pool of (haem) Fe2+ is a prerequisite resulting in free radicals or electrophilic intermediates or both.