NASBAによる増幅と組み合わせた分子ビーコンプローブは、RNAの均質でリアルタイムの検出を可能にします

分子ビーコンプローブをNasba Amplicon検出システムで使用して、増幅と同時に特定の蛍光シグナルを生成できます。標的配列内でハイブリダイズするように設計された分子ビーコンは、ジャガイモリーフロールウイルス（PLRV）のゲノムRNAを増幅するNASBA反応に導入されました。増幅中、プローブはNasbaによって生成されたアンチセンスRNAアンプリコンにアニールし、リアルタイムで監視できる特定の蛍光シグナルを生成します。アッセイは迅速で、敏感で、特異的です。RNAの増幅と検出は未開通の血管で実行できるため、持ち越しの汚染のリスクを最小限に抑えることができます。堅牢性は、実際のサンプルで検証されています。Amplidet RNAと呼ばれるこの均一なアッセイは、Nasba Ampliconsの現在の検出方法を大幅に改善し、ハイスループット診断から生物学的活性の生体内研究に至るまでのワンチューブ用途に適しています。

Molecular beacon probes can be employed in a NASBA amplicon detection system to generate a specific fluorescent signal concomitantly with amplification. A molecular beacon, designed to hybridize within the target sequence, was introduced into NASBA reactions that amplify the genomic RNA of potato leafroll virus (PLRV). During amplification, the probe anneals to the antisense RNA amplicon generated by NASBA, producing a specific fluorescent signal that can be monitored in real-time. The assay is rapid, sensitive and specific. As RNA amplification and detection can be carried out in unopened vessels, it minimizes the risk of carry-over contaminations. Robustness has been verified on real-world samples. This homogeneous assay, called AmpliDet RNA, is a significant improvement over current detection methods for NASBA amplicons and is suitable for one-tube applications ranging from high-throughput diagnostics to in vivo studies of biological activities.