ヒト単球とマクロファージは物質Pおよびニューロキニン-1受容体を発現します

私たちは、ヒト末梢血分解単球およびマクロファージにおける物質Pとその受容体の遺伝子発現を示すデータを提示します。RT-PCRアッセイを使用して、Preprotachykinin-A（Substance P）mRNAは、ヒト末梢血分解単球およびマクロファージで検出されます。物質P遺伝子のアルファ、ベータ、およびガンマ転写産物の中で、これらの細胞ではベータとガンマの転写産物のみが検出可能です。サザンブロットアッセイにより、これらのRT-PCR増幅された転写産物は、特定の物質Pプローブを使用して認識されます。単球とマクロファージの両方からのRT-PCR産物の配列分析も、ヒトニューロン細胞に見られるものと同一のこれらの転写産物の構造を確認しました。タンパク質レベルでは、ヒト単球とマクロファージの両方が、酵素免疫測定法によって決定されるように、内因性物質Pを生成しました。カプサイシンは、バニリル脂肪酸アミド（ホットコショウの成分）が、ヒト単球とマクロファージの両方から物質Pを放出しました。さらに、ネストされたRT-PCR分析を使用して、DNAシーケンス分析によって確認されたヒト末梢血分解単球およびマクロファージにおけるニューロキニン-1受容体（物質Pの受容体）のmRNAの存在を特定しました。ヒト単球とマクロファージが物質Pを発現することとその受容体は、物質Pがこれらの細胞の機能の調節にオートクリンの方法で生物学的に関与しているという概念を支持していることを示しています。

We present data demonstrating the gene expression of substance P and its receptor in human peripheral blood-isolated monocytes and macrophages. Using the RT-PCR assay, preprotachykinin-A (substance P) mRNA is detected in human peripheral blood-isolated monocytes and macrophages. Among the alpha, beta, and gamma transcripts of the substance P gene, only the beta and gamma transcripts are detectable in these cells. By Southern blot assay these RT-PCR-amplified transcripts are recognized using a specific substance P probe. Sequence analysis of the RT-PCR products from both monocytes and macrophages also confirmed the structure of these transcripts, which are identical to those found in human neuronal cells. At the protein level, both human monocytes and macrophages produced endogenous substance P as determined by an enzyme immunoassay. Capsaicin, a vanillyl fatty acid amide (ingredient of hot pepper), released substance P from both human monocytes and macrophages. In addition, using nested RT-PCR analysis, we identified the presence of mRNA for neurokinin-1 receptor (the receptor for substance P) in human peripheral blood-isolated monocytes and macrophages, which was confirmed by DNA sequencing analysis. The demonstration that human monocytes and macrophages express substance P and its receptor support the notion that substance P is biologically involved in regulating the functions of these cells in an autocrine fashion.