タンパク質チロシンホスファターゼデルタ（PTP Delta）の2番目の触媒ドメインは、PTP Sigmaの最初の触媒ドメインに結合して阻害します。

LAR、PTP Delta、PTP Sigmaを含むLARファミリータンパク質チロシンホスファターゼ（PTPS）は、細胞接着分子様外染色体と2つの細胞質触媒ドメインで構成される膜貫通タンパク質です。相互作用する調節タンパク質を識別するために、餌としてPTP Sigma（PTP Sigma-D1）の最初の触媒ドメインを使用した酵母2ハイブリッドスクリーンを実行しました。この画面を使用して、PTP Sigma-D1の相互作用因子としてPTP Delta（PTP Delta-D2）の2番目の触媒ドメインを特定しました。哺乳動物細胞からの酵母2ハイブリッド結合アッセイと共沈着の両方が、PTP Sigma-D1とPTP Delta-D2の間の強い結合を明らかにしました。ホスファターゼRPTPアルファにおけるD1ホモ二量体化。PTP Delta-D1はPTP Sigma-D2に結合しなかったため、この相互作用は相互的ではありませんでした。グルタチオンS-トランスフェラーゼ（GST）-PTP Delta-D2融合タンパク質（GST単独ではない）にGST-PTP Sigma-D1に添加したことにより、PTP Sigma-D1の触媒活性が約50％阻害されました。p-ニトロフェニルリン酸に対するin vitroホスファターゼアッセイ。PTP Sigma-D1活性の同様の阻害は、共免疫沈降PTP Delta-D2で得られました。興味深いことに、PTP Delta-D2と非常に類似しているLAR（LAR-D2）とPTP Sigma（PTP Sigma-D2）の2番目の触媒ドメインは、PTP Sigma-D1に縛られていません。PTP Delta-D1およびLar-D1は、PTP Sigma-D1よりもPTP Sigma-D1 >> PTP Delta-D1> LAR-D1の結合階層を使用して、PTP Delta-D2をPTP Sigma-D1よりも弱く結合することもできました。これらの結果は、PTP Sigma-D1とPTP Delta-D2との関連が、おそらく受容体ヘテロ二量体化を介して、負の調節機能を提供し、この2番目の触媒ドメインとおそらく他の受容体PTPの2番目の触媒ドメインは、代わりに代わりに機能する可能性があることを示唆しています。最初の触媒ドメインの活性。

The LAR family protein tyrosine phosphatases (PTPs), including LAR, PTP delta, and PTP sigma, are transmembrane proteins composed of a cell adhesion molecule-like ectodomain and two cytoplasmic catalytic domains: active D1 and inactive D2. We performed a yeast two-hybrid screen with the first catalytic domain of PTP sigma (PTP sigma-D1) as bait to identify interacting regulatory proteins. Using this screen, we identified the second catalytic domain of PTP delta (PTP delta-D2) as an interactor of PTP sigma-D1. Both yeast two-hybrid binding assays and coprecipitation from mammalian cells revealed strong binding between PTP sigma-D1 and PTP delta-D2, an association which required the presence of the wedge sequence in PTP sigma-D1, a sequence recently shown to mediate D1-D1 homodimerization in the phosphatase RPTP alpha. This interaction was not reciprocal, as PTP delta-D1 did not bind PTP sigma-D2. Addition of a glutathione S-transferase (GST)-PTP delta-D2 fusion protein (but not GST alone) to GST-PTP sigma-D1 led to approximately 50% inhibition of the catalytic activity of PTP sigma-D1, as determined by an in vitro phosphatase assay against p-nitrophenylphosphate. A similar inhibition of PTP sigma-D1 activity was obtained with coimmunoprecipitated PTP delta-D2. Interestingly, the second catalytic domains of LAR (LAR-D2) and PTP sigma (PTP sigma-D2), very similar in sequence to PTP delta-D2, bound poorly to PTP sigma-D1. PTP delta-D1 and LAR-D1 were also able to bind PTP delta-D2, but more weakly than PTP sigma-D1, with a binding hierarchy of PTP sigma-D1 >> PTP delta-D1 > LAR-D1. These results suggest that association between PTP sigma-D1 and PTP delta-D2, possibly via receptor heterodimerization, provides a negative regulatory function and that the second catalytic domains of this and likely other receptor PTPs, which are often inactive, may function instead to regulate the activity of the first catalytic domains.