成長および組換えタンパク質産生に対するBTI-TN5B1-4昆虫細胞の長期継代の影響

Trichopulsi NiのBTI-TN-5B1-4昆虫細胞株は、バキュロウイルス発現系における組換えタンパク質の分泌とより高い生産性を可能にしました。ここでは、この細胞株の初期通過ストックを、市販の「ハイファイブ」細胞株ストックと比較しています。初期の通過TN5B1-4細胞は、11 x 10（6）細胞/mlを超えて成長し、高5つの細胞よりも2.5倍の組換え分泌アルカリホスファターゼ（SEAP）を発現しました。細胞数ベースでの特定の生産性はわずかに高くなりましたが、初期の通過TN5B1-4細胞はこの生産性をより高い細胞密度で維持し、酸素条件の上昇下で体積生産性を50マイクログ/mLに増加させました。細胞のこれら2つのストックの違いは、それらが培養された時間の長さであり、早期通過の合計130の通路と高5セルの360の通路であることを提案します。この結論は、初期の通過TN5B1-4細胞の直径が4ミクロンで、細胞タンパク質含有量が小さいという事実によって裏付けられています（206対270マイクログのタンパク質/10（6）細胞）。懸濁液培養、および高5つの細胞と比較して、硫酸塩Dextranによるこれらの塊の分散の影響を受けにくい。

The BTI-Tn-5B1-4 insect cell line from Trichopulsi ni has enabled better secretion and higher productivity of recombinant proteins in the baculovirus expression system. An early passage stock of this cell line is compared here to the commercially available "High Five" cell line stock. The early passage Tn5B1-4 cells grew to over 11 x 10(6) cells/mL and expressed 2.5-fold more recombinant secreted alkaline phosphatase (SEAP) than the High Five cells. While the specific productivity on a cell number basis was only slightly higher, the early passage Tn5B1-4 cells maintained this productivity at higher cell densities, increasing their volumetric productivity to 50 microg/mL under elevated oxygen conditions. We propose that the difference in these two stocks of cells is the length of time they have been cultured, 130 total passages for the early passage versus 360 passages for the High Five cells. This conclusion is supported by the facts that the early passage Tn5B1-4 cells are smaller in diameter by 4 micron, smaller in cellular protein content (206 versus 270 microg of protein/10(6) cells), have an increased propensity to clump in suspension culture, and are less susceptible to dispersion of these clumps by dextran sulfate compared to the High Five cells.