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以前の研究では、U3小核極性(SNO)RNA、フィブリラリン、ヌクレオリン、およびタンパク質B23およびp52を含む前rRNA処理に関与する成分が、ペリクロモソーム領域および多数の有糸分裂細胞質粒子に蓄積することが示されました。初期の後期と後期のテルフェーズの間。後者の構造は、既知の半減期を持つpre-rRNAのセグメントのプローブを使用して、蛍光in situハイブリダイゼーションによってpre-rRNAの存在を分析しました。NDFには、47S Pre-RRNAのプライマリ処理サイトから上流の短命の5'External転写スペーサー(ETS)リーダーセグメントが含まれていませんでした。ただし、NDFには、5'-ETSコア、18S、内部転写スペーサー1(ITS1)、および28Sセグメントのシーケンスが含まれており、3'-ETSシーケンスのレベルも検出可能ですが大幅に減少しました。北部の分析では、有糸分裂細胞では、後者の配列が主に45S-46S前RRNAに存在し、高分子重量処理中間体が有糸分裂中に保存されることを示しています。NDF:U8 SnornaとHPOP1(RNase MRPとRNase Pのタンパク質成分)にも2つの追加の必須処理コンポーネントが見つかりました。したがって、NDFは、処理が大幅に抑制されている処理コンポーネントに関連する部分的に処理されたpre-RRNAを含む大きな複合体であるように見えます。NDFは、ポストミトス核小体の調整されたアセンブリを促進する可能性があります。
以前の研究では、U3小核極性(SNO)RNA、フィブリラリン、ヌクレオリン、およびタンパク質B23およびp52を含む前rRNA処理に関与する成分が、ペリクロモソーム領域および多数の有糸分裂細胞質粒子に蓄積することが示されました。初期の後期と後期のテルフェーズの間。後者の構造は、既知の半減期を持つpre-rRNAのセグメントのプローブを使用して、蛍光in situハイブリダイゼーションによってpre-rRNAの存在を分析しました。NDFには、47S Pre-RRNAのプライマリ処理サイトから上流の短命の5'External転写スペーサー(ETS)リーダーセグメントが含まれていませんでした。ただし、NDFには、5'-ETSコア、18S、内部転写スペーサー1(ITS1)、および28Sセグメントのシーケンスが含まれており、3'-ETSシーケンスのレベルも検出可能ですが大幅に減少しました。北部の分析では、有糸分裂細胞では、後者の配列が主に45S-46S前RRNAに存在し、高分子重量処理中間体が有糸分裂中に保存されることを示しています。NDF:U8 SnornaとHPOP1(RNase MRPとRNase Pのタンパク質成分)にも2つの追加の必須処理コンポーネントが見つかりました。したがって、NDFは、処理が大幅に抑制されている処理コンポーネントに関連する部分的に処理されたpre-RRNAを含む大きな複合体であるように見えます。NDFは、ポストミトス核小体の調整されたアセンブリを促進する可能性があります。
Previous studies showed that components implicated in pre-rRNA processing, including U3 small nucleolar (sno)RNA, fibrillarin, nucleolin, and proteins B23 and p52, accumulate in perichromosomal regions and in numerous mitotic cytoplasmic particles, termed nucleolus-derived foci (NDF) between early anaphase and late telophase. The latter structures were analyzed for the presence of pre-rRNA by fluorescence in situ hybridization using probes for segments of pre-rRNA with known half-lives. The NDF did not contain the short-lived 5'-external transcribed spacer (ETS) leader segment upstream from the primary processing site in 47S pre-rRNA. However, the NDF contained sequences from the 5'-ETS core, 18S, internal transcribed spacer 1 (ITS1), and 28S segments and also had detectable, but significantly reduced, levels of the 3'-ETS sequence. Northern analyses showed that in mitotic cells, the latter sequences were present predominantly in 45S-46S pre-rRNAs, indicating that high-molecular weight processing intermediates are preserved during mitosis. Two additional essential processing components were also found in the NDF: U8 snoRNA and hPop1 (a protein component of RNase MRP and RNase P). Thus, the NDF appear to be large complexes containing partially processed pre-rRNA associated with processing components in which processing has been significantly suppressed. The NDF may facilitate coordinated assembly of postmitotic nucleoli.
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