ラットの両側嗅球除去後のB-50/GAP-43およびGFAPの発現

本研究では、ラットにおける嗅球（OB）の2段階の両側病変の効果を調査し、末梢嗅覚ニューロンの再生能力と、免れのOBにおける再移転能力について調査しました。新しく生成された嗅覚軸索の伸長と、末端シナプス場の成熟は、成長関連リンタンパク質B-50/GAP-43の免疫組織化学によって検出されました。さらに、手術に対するグリア反応は、星状細胞の免疫組織化学マーカー、グリア線維性酸性タンパク質（GFAP）によって監視されました。新生児ラット（P3-P5）では、右のOBが除去され、3か月後に対側側が除去されました。2回目の手術の6日後、動物は横断的に灌流されました。彼らの脳は傍aplastに埋め込まれ、組織学的および免疫組織化学的観察のために連続切片にされ、処理されました。新生児の肥満の後、均一なB-50-免疫反応性（BIR）が前脳、嗅覚軸索、および小型の糸球体で、小さなOB Remnantのような構造および再生された神経上皮に局在していることが見つかりました。脳の皮質と、新しく形成された嗅覚軸索とOB Remnantの糸球体様構造で強いGFAP応答が明らかになりました。成体の肥満の後、嗅覚軸索で強いBIRが観察されましたが、残りの糸球体構造はかすかに染色されました。神経上皮は、BIRが大幅に減少した大規模な変性プロセスの兆候を明らかにしました。GFAP陽性の星状細胞は、OB全葉全体に散らばっており、糸球体様構造と隣接する前頭皮質で顕著でした。本研究では、GAP-43およびGFAP免疫組織化学を適用して、2段階の嗅覚球切除後の個々の嗅覚成分の反応を特徴付けました。さらに、2つの免疫組織化学マーカーによって特徴付けられるこのオブアブレーションモデルは、嗅覚系の再生および/または可塑性に関与する特定の分子メカニズムを解明する可能性があります。

In the present study we investigated the effect of a two-stage bilateral lesion of the olfactory bulb (OB) in rats on the regeneration ability of peripheral olfactory neurons and their reinnervation capacity in the spared OB. The outgrowth of newly-generated olfactory axons as well as the maturation of their terminal synaptic field was detected by immunohistochemistry of the growth-associated phosphoprotein B-50/GAP-43. In addition, the glial response to the surgery was monitored by an immunohistochemical marker for astrocytes, glial fibrillary acidic protein (GFAP). In neonatal rats (P3-P5), the right OB was removed, then three months later the contralateral side was ablated. Six days after the second operation the animals were transcardially perfused. Their brains were embedded in paraplast, serially sectioned and processed for histological and immunohistochemical observations. After neonatal OB ablation, homogeneous B-50-immunoreactivity (BIR) was found in the forebrain, olfactory axons and ectopic glomeruli localized in the small OB remnant-like structures and in the regenerated neuroepithelium. A strong GFAP response was revealed in the brain cortex as well as in the newly-formed olfactory axons and glomeruli-like structures of the OB remnants. After adult OB ablation strong BIR was observed in olfactory axons, while remaining glomerular structures were only faintly stained. The neuroepithelium revealed signs of massive degenerative processes with a substantial decrease in BIR. The GFAP-positive astrocytes were scattered throughout the entire OB remnant and were prominent in the glomeruli-like structures and adjacent frontal cortex. In the present study, we applied GAP-43 and GFAP immunohistochemistry to characterize the responses of individual olfactory components after two-stage olfactory bulbectomy. Furthermore, this model of OB ablation characterized by two immunohistochemical markers could elucidate certain molecular mechanisms involved in the regeneration and/or plasticity of the olfactory system.