浸透圧ストレスは、ラット肺胞II型細胞の分泌とアポトーシスの両方を誘導します

この研究の目的は、肺胞II型細胞の原発性培養におけるさまざまな細胞内シグナル伝達経路でのATPや12-O-テトラデカノイルフォルボール13-アセテート（TPA）などの浸透圧ショックとセクターゴーグの効果を分析し、調節における潜在的な役割を調べることでした。これらの細胞の分泌やアポトーシスなどのイベント。ソルビトール誘発性浸透圧ストレスにより、[3H]肺胞型II型細胞の一次培養物から[3H]塩化コリンでプライマー培養からの[3H]ホスファチジルコリン（[3H] PC）の持続的な放出を引き起こしました。この放出は、肺胞II型細胞で発現する主要なプロテインキナーゼCアイソフォーム（アルファ、ベタイ、デルタ、およびETA）のダウンレギュレーションが[3H] PC分泌に影響を与えなかったため、プロテインキナーゼCに依存していませんでした。ソルビトール、および既知のセクターゴーグTPAおよびATPは、細胞外シグナル調節キナーゼを活性化しました。細胞外シグナル調節キナーゼカスケードの阻害剤であるPD-98059はこの活性化をブロックしましたが、[3H] PCの放出に影響はありませんでした。ソルビトールおよび紫外線C放射は、TPAまたはATPではなく、P38とストレス活性化プロテインキナーゼ/C-Jun NH2末端キナーゼの両方を活性化することがわかった。さらに、ソルビトールと紫外線Cの両方の放射線は、凝縮された核のHoechst 33258染色、DNAはしごの生成、およびカスパーゼの活性化によって示されているように、肺胞II型細胞のアポトーシスを誘導しました。データは、複数のシグナル伝達経路がTPAやATPなどの従来のセクターゴーグと浸透圧ショックなどの細胞ストレスによって活性化され、これらが肺胞II型細胞の分泌およびアポトーシスイベントの調節に関与している可能性があることを示しています。

The aim of this study was to analyze the effects of osmotic shock and secretagogues such as ATP and 12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate (TPA) on various intracellular signaling pathways in primary cultures of alveolar type II cells and examine their potential role in regulating events such as secretion and apoptosis in these cells. Sorbitol-induced osmotic stress caused the sustained release of [3H]phosphatidylcholine ([3H]PC) from primary cultures of rat alveolar type II cells prelabeled with [3H]choline chloride. This release was not dependent on protein kinase C because downregulation of the major protein kinase C isoforms (alpha, betaII, delta, and eta) expressed in alveolar type II cells had no effect on [3H]PC secretion. Sorbitol, as well as the known secretagogues TPA and ATP, activated extracellular signal-regulated kinase. Although an inhibitor of the extracellular signal-regulated kinase cascade, PD-98059, blocked this activation, it had no effect on the release of [3H]PC. Sorbitol and ultraviolet C radiation, but not TPA or ATP, were also found to activate both p38 and stress-activated protein kinase/c-Jun NH2-terminal kinase. Furthermore, both sorbitol and ultraviolet C radiation induced apoptosis in alveolar type II cells as demonstrated by Hoechst 33258 staining of the condensed nuclei, the generation of DNA ladders, and the activation of caspases. The data indicate that multiple signaling pathways are activated by traditional secretagogues such as TPA and ATP and by cellular stresses such as osmotic shock and that these may be involved in regulating secretory and apoptotic events in alveolar type II cells.