抗トロポニンIモノクローナル抗体のエピトープマッピング

ヒト心臓トロポニンI（CTNI）に特異的なモノクローナル抗体（mAb）の2つのグループは、分離CTNI（グループI、16 mAB）またはトロポニン複合体全体（グループII、15 mAb）によってマウスの免疫によって生成されました。CTNIの完全なシーケンスを覆う2セットの重複するデカペプチドを調製し、スポットテクニックによるエピトープマッピングに使用しました。MABの大部分（31のうち28）は、合成ペプチドと相互作用するため、ライナーエピトープを認識していることを示しています。孤立したCTNIに対して育ったmAbsは、CTNIのNまたはC末端にあるエピトープを優先的に認識します。トロポニン全体の複合体に対して上昇した15個のmAbsのうち9個は、CTNIのN末端部分にあるエピトープと相互作用します。トロポニン複合体の内部内で孤立したCTNIとCTNIの両方を認識し、そのエピトープをマッピングするMABの生成は、急性心筋梗塞の患者の血清中のTNIの信頼できる検出を提供します。

Two groups of monoclonal antibodies (MAbs) specific to human cardiac troponin I (cTnI) were generated by immunization of mice by isolated cTnI (group I, 16 MAbs) or by the whole troponin complex (group II, 15 MAbs). Two sets of overlapping decapeptides covering the complete sequence of cTnI were prepared and used for epitope mapping by SPOT technique. Majority of MAbs (28 out of 31) interacts with synthetic peptides thus indicating that they recognize liner epitopes. MAbs raised against isolated cTnI preferentially recognize epitopes located at the N- or C-terminal ends of cTnI. Nine out of fifteen MAbs raised against whole troponin complex interact with epitopes located in the N-terminal part of cTnI. Generation of MAbs recognizing both isolated cTnI and cTnI inside of troponin complex and mapping their epitopes provides reliable detection of TnI in serum of patients with acute myocardial infarction.