酵母Hansenula PolymorphaにおけるZn（II）2Cys6転写因子をコードするYNA1遺伝子のクラスタリング窒素同化遺伝子YNT1、YNI1およびYNR1、およびその転写活性化におけるその関与

硝酸トランスポーター（YNT1）、亜硝酸還元酵素（YNI1）および硝酸還元酵素（YNR1）をコードする遺伝子は、酵母Hansenula Polymorphaでクラスター化されています。さらに、これらの遺伝子を含む領域のDNA配列決定により、YNA1（酵母硝酸塩同化）と呼ばれる新しいオープンリーディングフレームがYNR1とYNI1の間に位置することが示されました。YNA1遺伝子は、Zn（II）2CYS6真菌の転写因子のファミリーに属する529残基のタンパク質をコードし、NIRAによってコードされる転写因子と、硝酸塩に関与するNIT-4に対してより少ない程度の類似性を持っています。糸状菌におけるこの化合物の同化に関与する遺伝子の誘導。ノーザンブロット分析により、硝酸塩、硝酸塩に加えてアンモニウム、アンモニウム、および窒素を含まない培地でインキュベートした細胞にYNA1転写産物が存在し、アンモニウムでインキュベートされた細胞のレベルが低下しました。硝酸塩では、YNA1遺伝子が破壊されたDeltayna1 :: Ura3株は、遺伝子YNT1、YNI1、YNR1の成長も発現もしませんでした。遺伝子クラスターynt1-yni1-yna1-ynr1では、4つの遺伝子をynt1-> ynr1方向に個別に転写し、転写開始部位はプライマー伸長によって決定されました。

The genes encoding the nitrate transporter (YNT1), nitrite reductase (YNI1) and nitrate reductase (YNR1) are clustered in the yeast Hansenula polymorpha. In addition, DNA sequencing of the region containing these genes demonstrated that a new open reading frame called YNA1 (yeast nitrate assimilation) was located between YNR1 and YNI1. The YNA1 gene encodes a protein of 529 residues belonging to the family of Zn(II)2Cys6 fungal transcriptional factors, and has the highest similarity to the transcriptional factors encoded by nirA, and to a smaller extent to nit-4, involved in the nitrate induction of the gene involved in the assimilation of this compound in filamentous fungi. Northern blot analysis showed the presence of the YNA1 transcript in cells incubated in nitrate, nitrate plus ammonium, ammonium, and nitrogen-free media, with a decrease in its levels in those cells incubated in ammonium. In nitrate the strain Deltayna1::URA3, with a disrupted YNA1 gene, neither grew nor expressed the genes YNT1, YNI1 and YNR1. In the gene cluster YNT1-YNI1-YNA1-YNR1, the four genes were transcribed independently in the YNT1-->YNR1 direction and the transcription start sites were determined by primer extension.