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ショウジョウバエ翼ディスククローン8細胞の翼のない（WG）処理はアルマジロ（ARM）タンパク質の上昇を引き起こし、この効果はWGタンパク質のin vitroアッセイの基礎として使用されています。以前に分析されたショウジョウバエSchneider S2細胞のストックは、WG受容体Dfrizzled-2が不足しているため、追加されたWGに反応できませんでした。ただし、別のソースから得られたS2細胞のラインがDfrizzled-2とDfrizled-1を発現することがわかりました。したがって、この細胞株をS2R+（S2受容体Plus）として指定しました。S2R+細胞は、クローン8細胞と同様に、ARMおよびデカドヘリンタンパク質レベルを高め、DSH過剰を高リン酸化することにより、細胞外WGの添加に反応します。さらに、S2R+でのWGの過剰発現は、S2細胞ではなく、クローン8細胞で誘導されたDSH、ARM、およびDe-カドヘリンタンパク質の同じ変化を誘導し、これらのイベントが細胞で発生するWGシグナル伝達の一般的な効果であることを示しています。機能的なWG受容体の発現。さらに、S2細胞におけるリン酸化されていないDSHタンパク質は、DFRIZZLED-2またはマウス縮れた6-6の発現の結果としてリン酸化され、さまざまな縮れたファミリータンパク質に共通する基礎構造がこのDSHのリン酸化を引き起こすことを示唆しています。S2R+細胞は、クローン8細胞と同様にWGに敏感ですが、より単純な培地で成長する可能性があります。したがって、S2R+細胞株は、WGシグナル伝達のin vitro分析に非常に有用であることが証明される可能性があります。
ショウジョウバエ翼ディスククローン8細胞の翼のない（WG）処理はアルマジロ（ARM）タンパク質の上昇を引き起こし、この効果はWGタンパク質のin vitroアッセイの基礎として使用されています。以前に分析されたショウジョウバエSchneider S2細胞のストックは、WG受容体Dfrizzled-2が不足しているため、追加されたWGに反応できませんでした。ただし、別のソースから得られたS2細胞のラインがDfrizzled-2とDfrizled-1を発現することがわかりました。したがって、この細胞株をS2R+（S2受容体Plus）として指定しました。S2R+細胞は、クローン8細胞と同様に、ARMおよびデカドヘリンタンパク質レベルを高め、DSH過剰を高リン酸化することにより、細胞外WGの添加に反応します。さらに、S2R+でのWGの過剰発現は、S2細胞ではなく、クローン8細胞で誘導されたDSH、ARM、およびDe-カドヘリンタンパク質の同じ変化を誘導し、これらのイベントが細胞で発生するWGシグナル伝達の一般的な効果であることを示しています。機能的なWG受容体の発現。さらに、S2細胞におけるリン酸化されていないDSHタンパク質は、DFRIZZLED-2またはマウス縮れた6-6の発現の結果としてリン酸化され、さまざまな縮れたファミリータンパク質に共通する基礎構造がこのDSHのリン酸化を引き起こすことを示唆しています。S2R+細胞は、クローン8細胞と同様にWGに敏感ですが、より単純な培地で成長する可能性があります。したがって、S2R+細胞株は、WGシグナル伝達のin vitro分析に非常に有用であることが証明される可能性があります。
Wingless (Wg) treatment of Drosophila wing disc clone 8 cells leads to Armadillo (Arm) protein elevation, and this effect has been used as the basis of in vitro assays for Wg protein. Previously analyzed stocks of Drosophila Schneider S2 cells could not respond to added Wg, because they lack the Wg receptor, Dfrizzled-2. However, we found that a line of S2 cells obtained from another source express Dfrizzled-2 and Dfrizzled-1. Thus, we designated this cell line as S2R+ (S2 receptor plus). S2R+ cells respond to addition of extracellular Wg by elevating Arm and DE-cadherin protein levels and by hyperphosphorylating Dsh, just as clone 8 cells do. Moreover, overexpression of Wg in S2R+, but not in S2 cells, induced the same changes in Dsh, Arm, and DE-cadherin proteins as induced in clone 8 cells, indicating that these events are common effects of Wg signaling, which occurs in cells expressing functional Wg receptors. In addition, unphosphorylated Dsh protein in S2 cells was phosphorylated as a consequence of expression of Dfrizzled-2 or mouse Frizzled-6, suggesting that basal structures common to various frizzled family proteins trigger this phosphorylation of Dsh. S2R+ cells are as sensitive to Wg as are clone 8 cells but can grow in simpler medium. Therefore, the S2R+ cell line is likely to prove highly useful for in vitro analyses of Wg signaling.
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