コロナウイルスネガティブストランドゲノムRNA合成の重要性サブ遺伝子RNA転写前

メッセージの極性のRNAゲノムを有するコロナウイルスの細胞に感染した後に生じる（ - ） - 鎖ウイルスRNAは、ゲノムサイズでサブ遺伝子サイズです。それぞれ（ - ） - ストランドサブ遺伝子RNAは、感染した細胞で作られている各亜遺伝子mRNA種のそれぞれにサイズが対応しています。（ - ） - ストランドサブ遺伝子RNAが、サブ遺伝子mRNAの生産の前に、入力単一鎖（+） - ストランドゲノムRNAから最初に合成される可能性があるかどうかをテストしました。マウス肝炎ウイルス（MHV）欠陥のある干渉（DI）RNAを使用しました。このDiRNAには、このDiRNAがその内部に挿入された機能的MHV遺伝子間領域が挿入されているため、Di RNA複製細胞でサブ遺伝子RNAが生成されました。DI粒子を含むMHVサンプルに、UV光を照射し、重視の4時間前にMHVに感染した細胞に上浸潤しました。上浸潤の3時間後に抽出された細胞内RNAのノーザンブロット分析により、ゲノムDi RNAとサブ遺伝子型RNAが類似したUVターゲットサイズであることが示され、入力ゲノムDIRNA RNAからの（ - ） - 鎖ゲノムDiRNA合成がおそらく前に発生したことを示しています。サブ遺伝子サイズのDiRNA合成。コロナウイルス転写の過程で、（ - ） - ストランドゲノム長さのコロナウイルスRNA合成が、いずれかの極性のサブ遺伝子サイズのRNAが作成される前に発生する理由について説明します。

The (-)-strand viral RNAs that result from after infection of cells with coronaviruses, which possess RNA genomes of message polarity, are genomic-sized and subgenomic-sized. Each of the (-)-strand subgenomic RNAs corresponds in size to each of the subgenomic mRNA species that are made in infected cells. We tested whether (-)-strand subgenomic RNAs might initially be synthesized from the input single-stranded (+)-strand genomic RNA prior to the production of subgenomic mRNAs. We used a mouse hepatitis virus (MHV) defective interfering (DI) RNA. from which subgenomic RNA was produced in DI RNA-replicating cells, because this DI RNA had a functional MHV intergenic region inserted in its interior. MHV samples containing the DI particles were irradiated with UV-light and then superinfected into cells that had been infected with MHV 4 h prior to superinfection. Northern blot analysis of intracellular RNAs that were extracted 3 h after superinfection showed that genomic DI RNA and subgenomic DI RNA had similar UV-target sizes, indicating that (-)-strand genomic DI RNA synthesis from input genomic DI RNA probably occurred prior to the subgenomic-size DI RNA synthesis. We discuss why, in the course of coronavirus transcription, (-)-strand genomic-length coronavirus RNA synthesis might occur before subgenomic-sized RNAs of either polarity are made.