HIV-1エンベロープの細胞質ドメインにおける血漿膜局在信号は、小胞口炎ウイルスの出芽の部位での局在を防ぎ、VSVビリオンへの組み込みを防ぎます

以前の研究では、HIV-1エンベロープ（ENV）タンパク質は、細胞質尾部がVSV糖タンパク質（G）のそれに置き換えられない限り、小胞口炎ウイルス（VSV）ビリオンに組み込まれていないことが示されました。GテールがENVに正の取り込み信号を提供したかどうか、またはENV尾のシーケンスが取り込みを防ぐかどうかを判断するために、29、10、または3アミノ酸に短縮された150-アミノ酸テールでENVの変異体を生成しました（Envtr変異体、）。これらのタンパク質またはENV-G尾ハイブリッドを発現するVSV組換え剤に感染した細胞は、表面で同様の量のENVタンパク質を示しました。Env-GテールハイブリッドまたはEnvtr3変異体は、最高レベルで新進のVSVビリオンに組み込まれました。対照的に、ENVTR29またはENVTR10変異体の組み込みが不十分でした。これらの結果は、Env尾の10膜型近位アミノ酸に取り入れを妨げる信号を定義しました。共焦点顕微鏡検査により、このシグナルは、VSVタンパク質が濃縮されたVSV出芽部位とは異なる血漿膜ドメインへのヒト免疫不全ウイルス1型Envの局在を引き起こすことによって機能することを明らかにしました。

Previous studies showed that the HIV-1 envelope (Env) protein was not incorporated into vesicular stomatitis virus (VSV) virions unless its cytoplasmic tail was replaced with that of the VSV glycoprotein (G). To determine whether the G tail provided a positive incorporation signal for Env, or if sequences in the Env tail prevented incorporation, we generated mutants of Env with its 150-amino-acid tail shortened to 29, 10, or 3 amino acids (Envtr mutants). Cells infected with VSV recombinants expressing these proteins or an Env-G tail hybrid showed similar amounts of Env protein at the surface. The Env-G tail hybrid or the Envtr3 mutant were incorporated at the highest levels into budding VSV virions. In contrast, the Envtr29 or Envtr10 mutants were incorporated poorly. These results defined a signal preventing incorporation within the 10 membrane-proximal amino acids of the Env tail. Confocal microscopy revealed that this signal functioned by causing localization of human immunodeficiency virus type 1 Env to plasma membrane domains distinct from the VSV budding sites, where VSV proteins were concentrated.