テトラゼピノンは、MER+およびMER-ヒト腫瘍細胞株と同様に細胞毒性があります

ヒト脳および結腸腫瘍細胞株SF-188（MER+）およびWIDR（MER+）は、DNA修復タンパク質O6-メチルグアニン-DNAメチルトランスフェラーゼ（MGMT）を発現し、3〜30倍テモゾロミド、ミトゾロミド、ミトゾロミド、n、n'-bis（2-クロロエチル）-n-nitrosourea（bcnu）MGMT欠損腫瘍細胞SF-126（MER-）およびBE（MER-）。これらの細胞がテモゾロミドやミトゾロミドなどを含む新規のテトラゼピノンPyrz、Nime、Quincl、およびPyrclにさらされた場合、この微分感度は観察されませんでした。フローサイトメトリーの研究により、テモゾロミドはMer細胞でG2-M停止を誘導したことが明らかになりましたが、Mer+細胞のサイクルにわずかな効果を発揮しました。同様に、ミトゾロミド（25-100ミクロム）は、SF-188細胞よりもSF-126細胞で強力なS期停止を誘導しました。同じ用量範囲（25-100）で、BCNUはSF-126細胞でG22-Mに有意な細胞周期蓄積を誘導しましたが、SF-188細胞株ではほとんど誘導されませんでした。対照的に、テトラゼピノンの細胞周期効果は、細胞表現型とは無関係でした。O6-ベンジルグアニン（O6-BG）を使用してSF脳腫瘍細胞株のMGMT活性を枯渇させた場合、テモゾロミド（67倍）、ミトゾロミド（7倍）、およびBCNU（3倍）の有意な増強が観察されました。SF-188細胞株。対照的に、O6-BGはPyrz、Pyrcl、Quincl、およびNimeを増強しませんでした。さらに、MGMT阻害アッセイは、すべてのテトラゼピノンがSF-188細胞株でMGMTを不活性化できることを示しました。結果は、テモゾロミド、ミトゾロミド、およびBCNUとは異なり、テトラゼピノンの細胞毒性はグアニンのO6位置のアルキル化と相関せず、テトラゼピノンによるMGMTの不活性化のメカニズムが既知の既知の阻害剤のメカニズムとは異なる可能性があることを示唆しています。

Human brain and colon tumor cell lines SF-188 (Mer+) and WiDR (Mer+), which express the DNA repair protein O6-methylguanine-DNA methyl transferase (MGMT), were 3- to 30-fold less sensitive to temozolomide, mitozolomide, and N, N'-bis(2-chloroethyl)-N-nitrosourea (BCNU) than the MGMT-deficient tumor cells SF-126 (Mer-) and BE (Mer-). This differential sensitivity was not observed when these cells were exposed to the novel tetrazepinones PYRZ, NIME, QUINCL, and PYRCL, which contain, like temozolomide and mitozolomide, a ureido-triazene moiety. Flow cytometric studies revealed that temozolomide induced G2-M arrest in the Mer- cells, but exerted a minor effect on the cycle of the Mer+ cells. Similarly, mitozolomide (25-100 microM) induced a stronger S-phase arrest in the SF-126 cells than in the SF-188 cells. In the same dose range (25-100) BCNU induced a significant cell cycle accumulation in G22-M in the SF-126 cells but little in the SF-188 cell line. In contrast, the cell cycle effects of the tetrazepinones were independent of the cell phenotypes. When O6-benzylguanine (O6-BG) was used to deplete MGMT activity in the SF brain tumor cell lines, significant potentiation of temozolomide (67-fold), mitozolomide (7-fold), and BCNU (3-fold) was observed in the SF-188 cell line. By contrast, O6-BG did not potentiate PYRZ, PYRCL, QUINCL, and NIME. Moreover, an MGMT inhibitory assay showed that all the tetrazepinones were capable of inactivating MGMT in the SF-188 cell line, the strongest inhibitor being PYRCL. The results suggest that, unlike temozolomide, mitozolomide, and BCNU, the cytotoxicity of the tetrazepinones does not correlate with the alkylation of the O6 position of guanine and that the mechanism of MGMT inactivation by tetrazepinones may differ from that of hitherto known inhibitors.