アボカド/大豆の不沈着物は、培養された関節軟骨細胞における形質転換成長因子Beta1およびBeta2の発現を強化します

目的：アボカドと大豆の無理物（ASU）は、歯周疾患および骨関節症の治療に有益な効果を発揮することが報告されています。それらは、細胞外マトリックス成分の堆積と修復を刺激することになっていますが、その作用の根底にあるメカニズムはよく理解されていません。変形性関節症（OA）軟骨の修復能力と、変換成長因子ベータ（TGFBETA）システムがそのプロセスで果たすことができる役割を考慮して、in vitro研究を実施して、5月の関節軟骨細胞でのASUの作用メカニズムを決定するために実施しました。軟骨代謝に対する有益な影響を説明します。 方法：培養ウシの関節軟骨細胞をさまざまな濃度のASUで処理し、Tgfbetaアイソフォーム、1と2の両方の発現を処理し、その受容体（TgfbetariおよびTgfbetarii）はノーザンブロットおよび逆転写酵素 - ポリメラーゼ系統反応によって決定されました。TGFBETA1プロモーターコンストラクトを使用した細胞トランスフェクションを使用して、軟骨細胞のASU応答性を媒介するCIS-actingシーケンスを描写しました。プラスミノーゲン活性化因子阻害剤1（PAI-1）のレベルも、ノーザンブロッティングとタンパク質放射標識によって評価されました。 結果：データは、ASUが関節軟骨細胞によってTGFBETA1、TGFBETA2、およびPAI-1の発現を刺激することを示しました。対照的に、TGFBETARIとTGFBETARIIのレベルは、化合物によって有意に影響を受けませんでした。TGFBETA1プロモーターコンストラクトを一時的にトランスフェクトしたウシの関節軟骨細胞の治療は、TGFBETA1発現に対する効果が-732から-1132 bpの間にある領域によって媒介されることを示唆しています。 結論：結果は、培養された関節軟骨細胞で以前に報告されたマトリックス合成のASU誘導刺激が、これらの細胞でTGFBETA発現を強化する能力によって説明できることを示しています。さらに、ASUはPAI-1の産生を増加させます。これは、メタロプロテアーゼの活性化につながるプラスミンカスケードをブロックするのに役立つ効果です。これらのデータは、化合物が関節軟骨のTGFBETA誘発マトリックス修復メカニズムを促進する可能性のある特性を持っていることを示唆しています。

OBJECTIVE: Avocado and soya unsaponifiables (ASU) have been reported to exert beneficial effects in the treatment of periodontal and osteoarticular diseases. They are supposed to stimulate deposition and repair of extracellular matrix components, but the mechanisms underlying their action are not well understood. In view of the repair potential of osteoarthritic (OA) cartilage and the role that the transforming growth factor beta (TGFbeta) system could play in that process, we carried out in vitro studies to determine the mechanism of action of ASU on articular chondrocytes that may account for the beneficial effects on cartilage metabolism. METHODS: Cultured bovine articular chondrocytes were treated with various concentrations of ASU, and the expression of both TGFbeta isoforms, 1 and 2, and their receptors (TGFbetaRI and TGFbetaRII) was determined by Northern blot and reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Cell transfection with TGFbeta1 promoter constructs was also used to delineate the cis-acting sequences mediating ASU responsiveness in chondrocytes. The level of plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) was also evaluated by Northern blotting and protein radiolabeling. RESULTS: The data indicated that ASU stimulate the expression of TGFbeta1, TGFbeta2, and PAI-1 by articular chondrocytes. In contrast, the levels of TGFbetaRI and TGFbetaRII were not significantly affected by the compound. Treatment of bovine articular chondrocytes transiently transfected with TGFbeta1 promoter constructs suggested that the effect on TGFbeta1 expression is mediated by the region located between -732 and -1132 bp. CONCLUSION: The results indicate that the ASU-induced stimulation of matrix synthesis previously reported in cultured articular chondrocytes could be explained by the ability to enhance TGFbeta expression in these cells. Further, ASU increase the production of PAI-1, an effect that could help in blocking the plasmin cascade that leads to metalloprotease activation. These data suggest that the compound has properties that might promote TGFbeta-induced matrix repair mechanisms in articular cartilage.