血小板由来成長因子ベータ受容体（ベータ-PDGFR）の精製組換え細胞質ドメインのチロシンキナーゼ活性および受容体チロシンキナーゼの新規阻害剤の発見の発見

血小板由来成長因子とその受容体（PDGFR）の異常な発現は、心血管疾患や特定の種類の癌を含むさまざまなヒト障害に関係しています。PDGFRのチロシンキナーゼ活性の阻害剤は、これらの疾患と戦うための新規薬剤の開発におけるリードです。ここでは、PDGFRチロシンキナーゼ、3-（4-ジメチルアミノ - ベンジリデニル）-2-インドリノン（DMBI）の新規で強力な阻害剤について説明します。この化合物はまた、線維芽細胞成長因子受容体1（FGFR1）を介したシグナル伝達を阻害しますが、表皮成長因子受容体（EGFR）またはC-SRCチロシンキナーゼに対して活性はありません。DMBIおよび他のチロシンキナーゼ阻害剤の活性は、細胞ベースのアッセイと、膜貫通およびリガンド結合ドメインを欠く精製組換え血小板由来成長因子ベータ受容体（Beta-PDGFR）に基づくアッセイで比較されました。この切り捨てられたベータ-PDGFRが二量体になる可能性があり、チロシンキナーゼ活性に二量体化が必要であることを示しました。チロシンキナーゼ活性は、細胞内のベータ-PDGFR自己リン酸化の阻害剤によって調節されましたが、EGFRまたはC-SRCチロシンキナーゼの特定の阻害剤によっては調節されませんでした。膜貫通およびリガンド結合ドメインを欠くベータ-PDGFRは、全長受容体チロシンキナーゼの必須特性を保持していると結論付けています。

Aberrant expression of platelet-derived growth factor and its receptor (PDGFR) has been implicated in various human disorders, including cardiovascular disease and certain types of cancer. Inhibitors of the tyrosine kinase activity of PDGFR are leads in the development of novel agents to combat these diseases. We describe here a novel, potent inhibitor of PDGFR tyrosine kinase, 3-(4-dimethylamino-benzylidenyl)-2-indolinone (DMBI). The compound also inhibits signal transduction through fibroblast growth factor receptor 1 (FGFR1), but is not active towards epidermal growth factor receptor (EGFR) or c-Src tyrosine kinase. The activity of DMBI and other tyrosine kinase inhibitors was compared in a cell-based assay as well as in an assay based on purified recombinant platelet-derived growth factor beta-receptor (beta-PDGFR) lacking the transmembrane and ligand-binding domain. We showed that this truncated beta-PDGFR could dimerize, and that dimerization was required for tyrosine kinase activity. Tyrosine kinase activity was modulated by inhibitors of beta-PDGFR autophosphorylation in cells, but not by specific inhibitors of EGFR or c-Src tyrosine kinase. We conclude that beta-PDGFR lacking the transmembrane and ligand-binding domain retains the essential properties of the full-length receptor tyrosine kinase.