カルパインとカルパスタチンは好中球アポトーシスを調節します

平均的な多核好中球（PMN）は1日しか存在しない後、アポトーシスで死にます。以前、カルシウム依存性プロテアーゼカルパインは、細胞死のいくつかのマウスモデルのアポトーシスに必要であることがわかりました。ここでは、ヒト好中球アポトーシスの調節因子として、カルパインとその内因性阻害剤カルパスタチンを特定します。翻訳阻害剤シクロヘキシミドによってトリガーされる細胞死は、カルパイン活性部位阻害剤（N-アセチル - ロイシル - ノルルークナル）またはカルパインのカルシウム結合部位（PD150606、PD151746）を標的とする薬剤のいずれかを使用して証明されるように、カルパイン依存性です。シクロヘキシミドトリガーされたアポトーシスに有意な影響はありませんでした。プロテアソームまたは他のパパイン様システインプロテアーゼの阻害剤を使用して、活性部位のカルパイン阻害剤がカルパインでの作用を介してアポトーシスを防ぐというさらなる証拠を提供します。さらに、内因性阻害剤であるカルパスタチンを枯渇させることにより、カルパイン活性の増強が好中球のアポトーシスを引き起こすのに十分であることがわかります。それにもかかわらず、アポトーシスは、カルパイン阻害剤の存在に関係なく、FAS抗原収益を介してシグナル伝達されました。これらの実験は、増加している作業をサポートしており、アポトーシス細胞死のすべてではなく、多くではあるがカルパインの上流の調節的役割を示しています。彼らはまた、カルパスタチンをアポトーシス細胞死の参加者として特定し、少なくとも1つの細胞型について、カルパスタチンの減少はカルパイン依存性アポトーシスを開始するのに十分な刺激であることを示唆しています。

The average polymorphonuclear neutrophil (PMN) lives only a day and then dies by apoptosis. We previously found that the calcium-dependent protease calpain is required for apoptosis in several mouse models of cell death. Here we identify calpain, and its endogenous inhibitor calpastatin, as regulators of human neutrophil apoptosis. Cell death triggered by the translation inhibitor cycloheximide is calpain-dependent, as evidenced using either a calpain active site inhibitor (N-acetyl-leucyl-leucyl-norleucinal) or agents that target calpain's calcium binding sites (PD150606, PD151746). No significant effect on cycloheximide-triggered apoptosis was found by using inhibitors of the proteasome or of other papain-like cysteine proteases, providing further evidence that the active site calpain inhibitor prevents apoptosis via its action on calpain. In addition, we find that potentiation of calpain activity by depleting its endogenous inhibitor, calpastatin, is sufficient to cause apoptosis of neutrophils. Nevertheless, apoptosis signalled via the Fas antigen proceeds regardless of the presence of calpain inhibitor. These experiments support a growing body of work, indicating an upstream regulatory role for calpain in many, but not all, forms of apoptotic cell death. They also identify calpastatin as a participant in apoptotic cell death and suggest that for at least one cell type, a decrease in calpastatin is a sufficient stimulus to initiate calpain-dependent apoptosis.